细菌影载体负载防龋DNA疫苗免疫小鼠的效果研究

作者:刘高霞;樊明文;郭继华 刊名:中华口腔医学杂志 上传者:徐荣文

【摘要】目的 研制鼠伤寒沙门菌细菌影,负载防龋DNA疫苗,探寻增强防龋DNA疫苗黏膜免疫效能的方法.方法将pREP4质粒和噬菌体PhiX基因E表达质粒同时转入鼠伤寒沙门菌减毒株J357中,加入异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导,收集洗涤,负载防龋DNA疫苗,分4组经鼻免疫小鼠,分别为:细菌影+pGJGLU/VAX组,细菌影负载5μg防龋DNA疫苗pGJGLU/VAX;细菌影+pVAX1组,细菌影负载5μg空载体pVAX1;pGJGLU/VAX组,布比卡因包裹5 μg pGJGLU/VAX; pVAX1组,布比卡因包裹5μg pVAX1.酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测唾液抗体产生结果.结果 ELISA结果显示经鼻黏膜免疫鼠伤寒沙门菌J357细菌影负载的防龋DNA疫苗pGJGLU/VAX(细菌影+pGJGLU/VAX组)后,诱导了显著的唾液特异性抗葡聚糖结合区的IgA抗体,(x)±sx为(0.367 ±0.086) A/μg,与细菌影+pVAX1组[(0.122±0.077)A/μg]、pGJGLU/VAX组[(0.068±0.068)A/μg]和pVAX1组[(0.089±0.089) A/μg]相比,差异均有统计学意义(P值分别为0.028、0.012和0.030).结论 成功制备了鼠伤寒沙门菌细菌影,负载防龋DNA疫苗后经鼻黏膜途径免疫小鼠能有效提高免疫效能.

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中华 口腔医学 杂志 2014年 1月第 49卷第 l期 Chin J Stomatol,Janua~2014,Vo1.49,No.1 ·37· . 牙 体 牙 髓 病 学 研 究 . 细菌影载体负载防龋 DNA疫苗免疫小 鼠的 效果研究 刘高霞 樊明文 郭继华 【摘要】 目的 研制鼠伤寒沙门菌细菌影,负载防龋 DNA疫苗,探寻增强防龋 DNA疫苗黏膜免 疫效能的方法。方法 将 pREP4质粒和噬菌体 PhiX基因 E表达质粒同时转入鼠伤寒沙门菌减毒株 J357中,加人异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl B—D-1-- thiogalactopyranoside,IPTG)诱导,收集洗涤 ,负载 防龋 DNA疫苗,分4组经鼻免疫小鼠,分别为:细菌影 pGJGLU/VAX组,细菌影负载5 txg防龋 DNA 疫苗 pGJGLU/VAX;细菌影 +pVAXI组,细菌影负载 5 g空载体 pVAX1;pGJGLU/VAX组 ,布比卡因 包裹 5 txg pGJGLU/VAX;pVAXI组,布比卡 因包裹 5 Ixg pVAX1。酶联免疫吸附测定 (enzyme—linked immunosorbent assay,ELISA)法检测唾液抗体产生结果。结果 ELISA结果显示经鼻黏膜免疫鼠伤寒 沙门菌J357细菌影负载的防龋 DNA疫苗 pGJGLU/VAX(细菌影 +pGJGLU/VAX组)后 ,诱导了显著 的唾液特异性抗葡聚糖结合区的 IgA抗体, ±s 为 (0.367±0.086)A/Ixg,与细菌影 +pVAX1组 [(0.122-4-0.077)A/Ixg]、pGJGLU/VAX 组 [(0.068 4-0.068)A/Ixg]和 pVAX1组 [(0.089 4- 0.089)A/Ixg]相比,差异均有统计学意义(P值分别为 0.028、0.012和 0.030)。结论成功制备了鼠 伤寒沙门菌细菌影 ,负载防龋 DNA疫苗后经鼻黏膜途径免疫小鼠能有效提高免疫效能。 【关键词】 疫苗,DNA; 龋齿; 沙门菌 ,鼠伤寒; 细菌影 Ei cacy of imm une responses induced by anti·-caries DNA vaccine-loaded bacterial ghost in mice Liu Gaoxia,Fan Mingwen,Guo Jihua.The State Key Laboratory Breeding Base of Basic Science of Stomatology &Key Laboratory of Oral Biomedicine Ministry of Education,School of Stomatology,Wuhan University,Wuhan 430079,China Corresponding author:Guo Jihua,Email:gjhpp@hotmail.corn,Tel:0086—27—87686208 【Abstract】 Objective To develop an anti—caries DNA vaccine—loaded Salmonella typhimurium(St) ghost and enhance the efficacy of immune responses induced by anti—caries DNA vaccine via mucosal route.M ethods Both pREP4 and Ph

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