绿茶提取物EGCG对视网膜神经节细胞氧化应激损伤的防护作用

作者:范斌;李光宇;李亚萍;崔极哲 刊名:中华医学杂志 上传者:林群钦

【摘要】目的 研究绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对视网膜神经节细胞(RGC-5)氧化应激损伤的防护作用.方法 利用外源性活性氧(H2O2)造成RGC-5细胞的氧化应激损伤,同时应用EGCG进行保护.通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸缺口末端标记(TUNEL)验证RGC-5细胞的死亡方式,2',7'-二氢乙啡啶(OHE)染色实验检测细胞内活性氧簇(ROS)生成情况,蛋白质印迹法定量分析细胞核酶(PARP-1)的激活,噻唑蓝(MTT)法分析比较EGCG、维生素E水溶性衍生物(Trolox)和PARP-1抑制剂NU1025对RGC-5细胞的保护作用.结果 H2O2以浓度和时间依赖的方式降低RGC-5细胞活性,500μmol/L H2O2在24 h可以导致RGC-5细胞活性下降50%.H2O2可以导致RGC-5细胞凋亡,并显著增加细胞内ROS的生成,上调细胞核酶PARP-1的表达;而预先给予EGCG可以明显减少RGC-5细胞凋亡和细胞内ROS生成.MTT实验显示EGCG可以使氧化应激损伤中RGC-5细胞活性恢复到87%,而Trolox和NU1025可以分别提高细胞活性到62%和71%.结论 EGCG能够有效地防护氧化应激对视网膜神经节细胞的损伤,是一种极具开发潜力的神经保护性药物.

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2008年 6月 24日第 88卷第 24期 Nail Med J China,June 24,2008,Vo1.88 No.丝 绿茶提取物 EGCG对视 网膜神经节细胞 氧化应激损伤的防护作用 范斌 李光宇 李亚萍 崔极哲 【摘要】 目的 研究绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)对视网膜神经节细胞 (RGC-5)氧化应激损伤的防护作用。方法 利用外源性活性氧(H:O:)造成 RGC-5细胞 的氧化应激 损伤,同时应用 EGCG进行保护。通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸缺口末 端标记(TUNEL)验证 RGC一5细胞的死亡方式,2 ,7'-二氢乙啡啶(DHE)染色实验检测细胞内活性氧 簇(ROS)生成情况 ,蛋白质印迹法定量分析细胞核酶(PARP一1)的激活,噻唑蓝 (MTI")法分析比较 EGCG、维生素 E水溶性衍生物(Trolox)和 PARP一1抑制剂 NU1025对 RGC-5细胞的保护作用。结果 H:0:以浓度和时间依赖的方式降低 RGC-5细胞活性 ,500~mol/L H:0:在 24 h可以导致 RGC-5细 胞活性下降50%。H:0:可以导致 RGC-5细胞凋亡 ,并显著增加细胞 内 ROS的生成,上调细胞核酶 PARP.1的表达;而预先给予 EGCG可以明显减少 RGC-5细胞凋亡和细胞内 ROS生成。MTI"实验显 示 EGCG可以使氧化应激损伤中 RGC-5细胞活性恢复到 87% ,而 Trolox和 NU1025可以分别提高细 胞活性到 62%和71%。结论 EGCG能够有效地防护氧化应激对视 网膜神经节细胞 的损伤 ,是一种 极具开发潜力的神经保护性药物。 【关键词】 氧化性应激; 视网膜神经节细胞 ; 茶; 神经保护 Neuroprotective eect of epigallocatechin gallate on oxidative-stress-injured retinal ganglion cells FAN Bin,LI Guang-yu,LI Ya-ping,CUI Ji-zhe.Department of Ophthalmology,Second Hospital of Jilin University,Changchun 130041,China Correspond ing author:LIGuang-yu,Email:liguangyu_ box@ yaho o.corn.cn 【Abstract】 0bjective To investigate the neuroportective eect of epigallocatechin g8llate(EGCG), the main extract from green tea.on the oxidative.stress.injured retinal ganglion cells.Methods Rat retinal ganglion ces(RGC-5)were cultured into 3 groups(normal control;H202;H202+EGCG or Trolox or NU1025).In—situ TUNEL was used to detect the apoptosis of the RGC一5 cells.Dihydroethidium (DHE) assay was used to observe the intraceular ROS generation.The

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