黄芪多糖对糖尿病大鼠肾小管的保护作用

作者:王岩岩;康白;李广宙;殷昭珍;颜丽 刊名:中医药临床杂志 上传者:王迪

【摘要】目的:研究黄芪多糖(APS)对实验性糖尿病(DM)大鼠肾脏的保护作用及机制。方法:选取30只链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠,随机分为DM组、APS低剂量组和APS高剂量组各10只,另选择10只大鼠作为正常组。每组分别给药,每天用药1次,连续用药42d。采用简易代谢笼法测各组大鼠24h尿量变化,透射电镜观察肾远端小管和集合管主细胞超微结构的变化。结果:DM组、APS低剂量组、APS高剂量组大鼠尿量均明显高于正常组(P<0.05),APS低剂量组、APS高剂量组大鼠尿量明显高于DM组(P<0.05)。电镜显示,DM组大鼠肾远端小管和集合管主细胞的超微结构与正常对照组比较呈现明显退行性改变,而长期应用APS则可显著改善其超微结构的病变。结论:长期应用APS对DM大鼠肾小管的损伤具有良好保护作用,可明显增加DM大鼠的尿量。

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黄芪多糖(APS)具有固表止汗、补脾益气、托毒排脓和利水消肿之功效。近年来,临床和实验研究表明,APS可改善糖尿病对肾小球的损害2,对糖尿病患者肾脏有保护作用,但其对肾小管的影响则鲜见报道。本实验系统观察了APS对链脲佐菌素(STZ)诱导的DM大鼠肾小管超微结构的变化及对尿量的影响,意在探讨APS对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制,为APS的临床应用提供理论依据。材料与方法1实验动物健康雄性Wistar大鼠清洁级,50只,体重(20020)g,购自山东大学医学院实验动物中心。实验动物质量合格证明号:SCXK鲁20030004。2药品与仪器STZ由美国Sigma公司生产,进口分装,北京拜尔迪生物技术公司供应;APS由西安沃森生物科技有限公司提供;H-7500透射电子显微镜由日本日立公司生产;大鼠代谢笼按徐氏法自行改良制备。3糖尿病大鼠的制备选择空腹血糖(FBG)正常的健康雄性Wistar大鼠40只,以55mg/kg的剂量一次性腹腔注射STZ(PH4.5,用0.1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液在冰浴中新鲜配制),72h后测定尾静脉血糖,以随机血糖含量16.7mmol/L者确定为糖尿病大鼠3。4分组与用药选取30只糖尿病大鼠,随机分为DM组、APS高剂量组、APS低剂量组,每组10只,另纳入10大鼠为正常组[4]。模型成功后次日,低剂量组均给予APS200mg/(kgd)-1,高剂量组均给予APS400mg/(kgd)-1,正常组和DM组给予等容量的生理盐水,8~9amiP/d,连续给药42d。5尿液的收集于第41天给药前30min,给予50ml/kg生理盐水水负荷,30min后,逐一挤压大鼠下腹部排尽余尿,各组给药后,立即放入代谢笼,收集给药后24h尿量。6肾组织取材与摄片10%水合氯醛麻醉大鼠,打开腹腔,充分暴露两侧肾脏,迅速取出肾脏髓质组织,修成约1mm1mm1mm的小块,用预冷的NS冲洗,并置于5%戊二醛中固定,常规制备样品,钻石刀超薄切片,用H-7500型透射电镜观察并拍照。7统计学处理所有数据均以(xs)表示,用SPSS11.5统计软件进行单因素方差分析;组间均数差异采用q检验;以P<0.05为有统计学显著差异。结果1对大鼠尿量的影响DM组、APS低剂量组、APS高剂量组大鼠尿量均明显高于正常组,差异有显著性(P<0.05);APS低剂量组、APS高剂量组大鼠尿量明显高于DM组,差异有显著性(P<0.05)。提示APS可明显增加DM大鼠尿量。见表1。表1黄芪多糖对DM大鼠尿量的影响(xs)组别剂量/mgkg-1尿量/ml正常组(n=10)4.000.79DM组(n=10)29.201.92*APS低剂量组(n=10)20033.003.16*APS高剂量组(n=10)40035.301.89*注:与正常组比较*P<0.05;与DM组比较P<0.05。2对大鼠肾脏超微结构的影响正常组大鼠肾远端小管和集合管主细胞超微结构完整,各结构清晰可见。细胞核大而圆,染色质分散;基底膜边界清晰,电子密度均匀,基底面质膜内褶整齐并环绕M,边界清晰,其间可见大量正常线粒体,且线粒体结构完整,线粒体嵴清晰可见;细胞间有连接复合体,并可见桥粒连接,游离面大量微绒毛;DM组可见细胞核不规则皱固缩,细胞核周隙局部增宽且核内异染色质有边集现象;基底面质膜内褶出现溶解现象;线粒体肿胀模糊,线粒体嵴溶解或消失;APS低剂量组可见少数细胞核固缩及核周隙增宽,较少细胞核内异染色质有边集现象;部分细胞可见基底面质膜内褶;线粒体较丰富,线粒体嵴部分排列整齐密集,小部分紊乱、消失,

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