云南丽江产白雪茶多糖提取工艺及抗氧化作用

作者:林春榕;罗永会;张翠香;韩红;胡志强;左绍远 刊名:食品研究与开发 上传者:栾颖凡

【摘要】采用水提醇沉法从云南丽江产白雪茶中分离提取出雪茶多糖(Thamnolia vermicularis polysaccharide,TP),以多糖提取率为观察指标,用正交试验选择多糖提取的最佳工艺条件,并观察白雪茶多糖在体外的抗氧化作用。结果表明,白雪茶多糖的最佳提取工艺条件为提取温度80℃、提取时间12 h、料液比1∶15(g/mL);此工艺条件下多糖平均得率为2.609%(RSD=1.48%)。体外抗氧化结果表明,白雪茶多糖对.OH和O2-.有一定的清除作用,且呈剂量效应关系。

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白雪茶(Thamnoliavermicularis(Sw.)Ach),又称地衣,太白茶,为地衣类地茶科地茶属植物,全株呈白色或灰绿色,管状,长3cm7cm,直径3mm~5mm。雪茶为耐寒植物,生长于海拔4000m以上的高山地区,在云南的迪庆、丽江、大理苍山等地区分布较广泛,在滇西北地区一直作为一种传统饮品及旅游食品使用。雪茶性寒,具有清热、消暑、生津止渴等功效[1],对中暑、肺热咳嗽、高血压及肥胖等有一定防治作用[1]。多糖是一类结构复杂的生物大分子物质,具有多种复杂而广泛的生物学活性[2-4],已成为功能性食品新资源的研究开发的热点之一。我们前期研究表明,白雪茶多糖具有促进免疫功能的作用[5]。为综合开发利用云南白雪茶资源,我们对云南丽江产白雪茶中多糖的分离提取工艺及其在体外抗氧化活性进行了研究,以期为研究开发白雪茶深加工食品、扩大白雪茶的用途提供参考。1材料1.1试剂与原料D-葡萄糖标准品:Sigma公司;硫酸亚铁、水杨酸、双氧水、三羟甲基氨基甲烷、无水乙醇、丙酮、乙醚、正丁醇、三氯甲烷、硫酸等试剂:均为国产化学分析纯。白雪茶,云南丽江红叶土特产经营公司产品(批号:20101102)。1.2仪器HH-W420/600恒温水浴箱:金坛市瑞华仪器有限公司;AG135电子天平:瑞士梅特勒-托利多公司;RE-52A型旋转蒸发仪:上海亚东生化仪器厂;FD-1型冷冻干燥机:北京博医康技术有限公司;UV2550型紫外可见分光光度计:日本岛津苏州仪器有限公司;TDL-5-A低速台式大容量离心机:上海安亭科学仪器纯厂。2方法2.1标准曲线的绘制[6]精密称取105干燥至恒重的葡萄糖标准品100.0mg置100mL容量瓶中,用蒸馏水溶解后,稀释至100mL定容,得葡萄糖标准储备液。吸取储备液10.0mL置100mL容量瓶中,用蒸馏水定容,得葡萄糖标准应用液(100g/mL)。精密吸取应用液0.10、0.20、0.30、0.40、0.50、0.60、0.70、0.80mL,分别置于具塞试管,补蒸馏水至总体积2.0mL,加6.0%苯酚试剂1.0mL后,各管迅速加浓H2SO45.0mL,摇匀,沸水加热10min,迅速流水冷却,另取2.0mL蒸馏水,同法操作,加入试剂作空白对照,在490nm测定吸光度。以吸光度为纵坐标,葡萄糖质量浓度为横坐标,绘制标准曲线。2.2白雪茶多糖的提取工艺流程与多糖提取率的测定称取白雪茶200.0g,粉碎后用石油醚、95%乙醇各回流1次,每次2h。滤渣加蒸馏水水浴浸提2次,合并滤液,减压浓缩至适当体积后加95%乙醇至乙醇体积分数为75%醇沉,置4过夜,离心,沉淀用Sevag法脱蛋白[6]至280nm无明显蛋白吸收峰后,加95%乙醇至乙醇体积分数为80%醇沉,沉淀用蒸馏水透析24h,醇沉,沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤3次,-20冷冻干燥至恒重,得白雪茶粗多糖样品,置玻璃干燥器中备用。精密称取白雪茶粗多糖样品100.0mg,按2.1方法同法操作,测定吸光度。根据葡萄糖标准曲线计算出粗多糖样品中多糖的质量分数。按公式:多糖提取率(%)=[多糖质量分数(%)粗多糖样品质量(g)/蜂花粉干重质量(g)]100计算多糖提取率。2.3白雪茶多糖提取的正交试验本实验选择提时间、提取温度,料液比为观察因素,采用L(934)正交试验表设计试验(见表1),以多糖提取率为考察指标,筛选最佳提取条件。2.4白雪茶多糖对清除羟基自由基(OH)的作用参考文献[7-8]方法进行。将多糖样品配制为0.10、0.20、0.30、0.40、0.50、0.60mg/mL质量浓

参考文献

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