胃癌组织中Livin蛋白的表达及其与临床生物学行为及细胞增殖的关系

作者:汪海;韩子华 刊名:中国现代医生 上传者:孙志群

【摘要】目的探讨胃癌组织中Livin蛋白的表达及其与临床生物学行为及细胞增殖的关系。方法免疫组化检测70例胃癌及癌旁正常组织中Livin蛋白的表达,并探讨其与性别、年龄、组织分化度、浸润深度和淋巴结转移等临床生物学行为和细胞增殖的关系。结果胃癌标本中Livin的阳性率明显高于癌旁正常组织(χ2=18.53,P<0.01)。高-中分化胃癌Livin阳性率明显低于低-未分化,T1~2期胃癌Livin阳性率明显低于T3~4期,无淋巴结转移胃癌Livin阳性率明显低于有淋巴结转移(P均<0.05)。Livin表达阴性的胃癌组织中PCNA增殖指数明显低于Livin表达阳性(P<0.05)。结论 Livin基因参与胃癌的发病过程,与胃癌细胞的异常增殖和恶性转化密切相关,Livin基因不仅参与癌细胞凋亡的调控,还促进了癌细胞的异常增殖。

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近年来研究认为肿瘤的发病过程多步骤、多阶段、有序的病理过程,不仅与癌细胞异常分化密切相关,而且与癌细胞凋亡受抑制相关。凋亡通路的调节紊乱及凋亡相关基因及蛋白的表达异常,均可导致肿瘤的发生和发展。近年来凋亡抑制蛋白(IAP)家族在恶性肿瘤中的作用逐渐引起人们重视。Livin是IAP家族一种新成员,常在人胚胎组织和大多数实体肿瘤中特异性表达,而在正常人体组织中表达较少、甚至不表达,对抑制癌细胞的凋亡起着重要作用。近年来研究发现其异常表达与肿瘤的发生、发展、转移和预后等病理特征密切相关,但有关胃癌组织中Livin基因的表达及其与生物学行为的关系国内外报道较少[1,2]。本研究观察了胃癌组织中Livin蛋白的表达及其与临床生物学行为及细胞增殖的关系,现报道如下。1材料与方法1.1标本来源收集2007年8月2012年7月两院有完整临床及病理学资料的胃癌及癌旁正常组织存档蜡块70例,常规予以组织固定、脱水、透明、包埋及切片。其中男48例,女22例,年龄3987岁,平均(64.27.1)岁。术前均未行化放疗和免疫治疗。1.2免疫组化染色采用常规Envision二步法测定Livin和PCNA的表达。常规4m石蜡切片,逐级脱蜡到水,3%双氧水室温下常规孵育10min,微波进行抗原修复,滴加血清封闭15min,倾去血清分别滴加Livin或PCNA一抗常规4过夜,后滴加二抗37C孵育30min,常规予以显色、复染、脱水、透明、封片及镜检。用已知阳性切片行阳性对照,以PBS溶液代替一抗工作液行阴性对照。兔抗人Livin蛋白多克隆抗中国现代医生CHINAMODERNDOCTOR体、鼠抗人PCNA单克隆抗体和免疫组化Envision二步法试剂盒均由北京中杉金桥生物公司提供,严格按照试剂盒所附说明书进行实验。1.3结果判定1.3.1Livin染色判断[3]以胞浆出现棕黄(褐)色颗粒为阳性细胞。按高倍镜下细胞染色强度无着色、浅黄色、棕黄色和棕褐色分别计为03分;另选5个随机高倍视野,根据阳性细胞的比例分别计为04分,其中(-)计0分、10%计1分、11%50%计2分、51%75%计3分、>75%计4分。根据细胞染色强度和阳性细胞比例计分的乘积2分即认为Livin(+)。1.3.2增殖指数(PI)采用高清晰度彩色图文分析系统,选择10个高倍视野,观察1000个肿瘤细胞中PCNA染色的阳性细胞百分比,即为增殖指数(PI)。1.4统计学处理采用SPSS17.0统计学软件分析。计数资料结果以率表示,采用2检验。2结果2.1胃癌及癌旁正常组织中Livin表达的差异70例胃癌组织标本中的Livin表达阳性36例,其中强阳性为14例。70例癌旁正常组织中4例Livin表达弱阳性。胃癌标本中Livin表达的阳性率明显高于癌旁正常组织(2=18.53,P<0.01)。见图1。图1Livin强阳性的胃癌组织,胞浆棕黄色,染色不完全均匀(400)2.2胃癌组织中Livin表达与临床生物学行为的关系胃癌组织中Livin表达与性别和年龄无明显的统计学关系(P>0.05)。高-中分化胃癌Livin阳性率明显低于低-未分化,T1~2期胃癌Livin阳性率明显低于T3~4期,无淋巴结转移胃癌Livin阳性率明显低于有淋巴结转移,差异均有统计学意义(P均<0.05)。见表1。2.3胃癌组织中Livin表达与细胞增殖的关系Livin表达阴性和阳性的胃癌组织中PCNA增殖指数分别为(37.2413.25)%和(57.2718.75)%。Livin表达阴性胃癌组织中PCNA增殖指数明显低于Livin表达阳性(t=2.

参考文献

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