强直性脊柱炎患者外周血T淋巴细胞亚群的表达

作者:杨荣助;宋建新 刊名:检验医学与临床 上传者:连贺林

【摘要】目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者外周血CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD8+CD45RA+和CD8+CD45RO+T淋巴细胞亚群的表达及与免疫功能的关系。方法用流式细胞仪检测55例AS患者(分AS病情活动组30例、稳定组25例)CD4+、CD8+细胞CD45RO、CD45RA的表达,并与健康对照组进行比较。结果 AS患者活动期CD4+CD45RO+、CD8+CD45RO+T淋巴细胞表达明显高于健康对照组(P<0.01),CD4+CD45RA+、CD8+CD45RA+明显对低于健康对照组(P<0.01);稳定期CD4+CD45RO+、CD8+CD45RO+与活动期比较明显降低(P<0.05),但仍高于健康对照组(P<0.05);CD4+CD45RA+、CD8+CD45RA+与活动期相比明显升高(P<0.05),但仍低于健康对照组(P<0.05)。结论 CD4+CD45RO+、CD8+CD45RO+和CD4+CD45RA+、CD8+CD45RA+T淋巴细胞的异常表达是导致强直性脊柱炎患者机体免疫功能失去平衡的重要原因。

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强直性脊柱炎(AS)是一种进行性发展以脊柱关节和骶髂关节慢性炎症为主要表现的自身免疫性疾病,其病因及发病机制至今仍不十分清楚。CD45RA、CD45RO作为人CD45的重要亚型,很早就被用作区分初始和记忆T淋巴细胞的标识,在免疫应答和自身免疫等方面具有重要意义[1]。本研究应用流式细胞技术,检测AS患者活动期及稳定期外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞CD45RO、CD45RA亚群的变化,以探讨AS患者免疫功能变化特点。1材料与方法1.1一般资料选择2009年5月至2012年11月云南省第一人民医院风湿免疫科收治的AS患者55例,男42例,女13例,年龄1252岁;其中活动期30例,稳定期25例,诊断均符合1984年修订的强直性脊柱炎纽约分类标准[2]。活动指标为:红细胞沉降率(ESR)>25mm/h,有脊背痛,晨僵不小于30min,伴周围关节肿痛,Bath强直性脊柱炎活动性指数(BAS-DAI)4。健康对照组为来云南省第一人民医院体检的健康体检者,共35例,年龄1449岁,无AS既往史和家族史,排除其他自身免疫性疾病和感染性疾病表现。1.2方法1.2.1主要试剂与仪器异硫氰酸荧光素(FITC)标记的抗CD45RA单抗、藻红蛋白(PE)标记的抗CD45RO单抗和藻红蛋白-菁蓝色素荧光素(PE-Cy5)标记的抗CD4、CD8单抗,以上试剂均由法国Immunotech公司,流式细胞仪为COULTEREPICS-XL。1.2.2标本处理于清晨空腹分别采集AS活动期、稳定期及对照组的空腹静脉血1.0mL,肝素抗凝4h内检测。取100L抗凝血,加入CD4-PE-Cy5(或CD8-PE-Cy5)、CD45RO-PE、CD45RA-FITC单抗各20L,混匀,室温避光孵育30min,经Q-Prep处理后,用3.0mL冷PBS洗涤细胞一次,弃上清液,加入1.0mL冷PBS重悬细胞后用流式细胞仪检测,结果用百分率表示。1.3统计学处理使用SPSS12.0统计软件包进行统计分析。数据以xs表示,采用方差分析对3组均数进行统计分析,并用q检验进行各组均数间的两两比较,以P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1AS患者活动期CD4+CD45RO+T淋巴细胞明显高于健康对照组(P<0.01),CD4+CD45RA+明显低于健康对照组(P<0.01),CD45RO+/CD45RA+明显增高(P<0.01);稳定期CD4+CD45RO+与活动期比较明显降低(P<0.05),但仍高于健康对照组(P<0.05);CD4+CD45RA+与活动期相比明显升高(P<0.05),但仍低于健康对照组(P<0.05)。见表1。表1AS患者活动期、稳定期及对照组淋巴T细胞表达(xs,%)组别nCD4+CD45RO+CD4+CD45RA+CD45RO+/CD45RA+活动期3069.878.10a18.746.32a17.072.30a稳定期2547.283.96bc26.523.62bc10.521.81bc健康对照组3534.023.3737.964.025.281.24注:与健康对照组相比,aP<0.01;与健康对照组相比,bP<0.05;与活动期相比,cP<0.05。2.2AS患者活动期CD8+CD45RO+T淋巴细胞明显高于健康对照组(P<0.01),CD8+CD45RA+明显对低于健康对照组(P<0.01),CD45RO+/CD45RA+明显增高(P<0.01);稳定期CD8+CD45RO+与活动期比较明显降低(P<0.05),但仍高于健康正常对照组(P<0.05);CD8+CD4

参考文献

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