丝孢酵母对苹果采后灰霉病和青霉病抑制效果的影响

作者:范青;田世平;徐勇 刊名:中国农业科学 上传者:陈成华

【摘要】研究了丝孢酵母(Trichosporon sp)的不同处理和接种时间对“富士”苹果灰霉病和青霉病的抑制效果。结果表明,当接种灰霉菌和青霉菌孢子浓度分别为1×105个/ml和5×104个/ml时,在25℃下.1×108CFU/ml的酵母悬浮液完全抑制这两种病害的发生;在 1℃下冷藏 30d后.灰霉病和青霉病的发病率分别为 13%和 0。接种酵母菌的滤液对病害没有抑制作用。Trichosporon sp能在苹果伤口迅速繁殖,以 25℃ 下最初的 48h内和 1℃下的最初 5d内增长最快,分别增加了50和20倍以上,以后基本维持在此水平。酵母菌和病菌孢子的接种时间与生物防治效果有关,先接种拮抗菌的抑菌效果显著地好于同时或后于病菌接种的效果。

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因病原真菌而引起的果蔬采后腐烂是巨大的,长期以来防治真菌病害的方法主要是采用化学杀菌剂“’。然而由于病菌对杀菌剂产生抗药性“,农药对环境的污染和对公众健康的危害‘”以及一此最有效杀菌剂的禁用)广,人们不得不寻求能取代当前化学杀菌剂的安全、无毒和有效的新方法。大量的研究表明,生物防治是最具潜力的一种方法”‘’。目前国外己经分离和筛选了许多能有效防治多种果实采后病害的桔抗菌“‘”苹果灰霉病()和青霉病(几)是给生产带来巨大损失的两种常见贮藏病害,即使在贮藏条件和技术很发达的地方也不例外‘。国外曾有人用桔抗细菌。。和酵母菌防治这两种病害‘’”’‘。。是我们从桃果实表面上分离和筛选的酵母菌,目前尚未见以它作为果蔬采后病害生物防治的桔抗菌的任何报道。筛菌试验表明,它能有效地防治采后桃果实的青霉病(未发表资料)。本文主要研究丝抱酵母()的不同处理和接种时间对“富士”苹果灰霉病和青霉病的抑制效果,以及该菌在伤口上的定殖,并对其抑菌机理进行了评价。材料与方法试验用果供试苹果()为北京农林科学院林果研究所果园内生产的“富士”,在苹果充分成熟时采摘。选择外观整齐、无病虫危害的果实,立即运至中国科学院植物研究所于回下冷藏,后进行试验,此时果实的硬度为’(硬度计型号为,意大利),可溶性固型物为。将从冷库中取出的苹果用的表面消毒,再冲洗、晾干后,备用。抗菌》。是按‘”。的方法从黄桃果实上分离获得,由英国国际微生物研究所()鉴定。从琼胶斜面上蘸取少许酵母菌于(营养肉汤,酵母浸膏,葡萄糖,琼脂,水)培养基平板上划线后于下培养,再用接种环取两环于盛有培养液(不加琼脂的)的三角瓶中,下振荡培养后,制备成以下处理液:叭)培养原液,将浓度用血球计配至‘细胞;)滤液:用滤膜将培养酵母液过滤即得;)悬浮液:培养液在下离心后,弃上清,加人无菌水,混合后再重复离心、弃上清,加人无菌水,最后用血球计将浓度配至卫‘细胞;山)热杀死液:将培养原液在下高压灭菌九为无菌水。病菌,。。和。分离于自然发病的苹果果实。将其分别接种于(燕麦琼脂培养基)和培养基上,在下培养后,用含有无菌水冲下,配至所需浓度的抱子悬浮液。不同处理对苹果灰、青霉病的抑制用消毒的接种针在果实腰部刺一(深)(宽)的伤口,分别接种上述、、刀和等种处理液,后,再分别接种工’个加的灰霉菌或‘个加的青霉菌抱子悬浮液,晾干后将果实单个放在托盘上,装人。塑料筐内,外套一塑料袋以保持左右的相对湿度,分别贮于和下。贮藏和后测定果实的发病率及病斑直径,然后将下贮藏的果实转人下放置统计货架期的发病情况。每处理个果实,重复次。酵母菌和病菌抱子接种时间对抑菌效果的影响在接种浓度为’细胞灿酵母菌的前、、,同时和后、、、的不同时间内分别接种尸的灰霉菌门’个)和青霉菌(‘个)抱子悬浮液,保湿贮藏于下,后测定发病情况。每处理个果实,重复次。酵母菌在苹果果实伤口上的生长动态本试验分单独接种酵母菌和接种酵母菌后再接种病菌(以观察在病菌存在时桔抗菌在伤口的定殖动态)两种处理。取酵母菌悬浮液于果实伤口内后测定的酵母数为起始值。将果实保湿贮于和下,下的每天测一次酵母数,下的内每测一次,贮藏至时再测一次。测定方法是用打孔器从伤口处取直径和高均为的果肉组织,放于内加的的磷酸缓冲液的研钵内,研磨后用稀释平板法记数。每处理个果实,试验重复次。将所得酵母的转化成;。对数。离体()实验取‘、’、‘(:)悬浮液、高压灭菌液(加在下灭菌)及滤液各于内装的试管内,对照只加灭菌水,再在各试管内分别加人’个冲的抱子悬浮液。将试管放于摇床内,以在下振摇培养后,用普通光学显微镜观测至少个抱子,统计各处

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