斑秃患者外周血淋巴细胞亚群的研究

作者:裴洪利 刊名:中国实用医药 上传者:覃红艳

【摘要】目的对斑秃患者外周血T淋巴细胞亚群及B细胞、NK细胞进行分析。方法应用流式细胞仪检测44例斑秃患者及40例正常对照人群的外周血淋巴细胞亚群。结果44例斑秃患者外周血中总T、TH细胞及TH/TS比值均明显低于正常对照组(P<0.002),TS则显著高于正常对照组(P<0.001),另外,B细胞和NK细胞与正常对照组相比无统计学差异(P>0.05)。结论本研究结果提示斑秃患者外周血中T淋巴细胞亚群存在着明显的细胞紊乱和细胞免疫抑制。

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斑秃为一种突然发生的局限性斑片状脱发,可发生于身体任何部位。近年来的研究显示,斑秃的发病与免疫机制相关[1]。为了探讨斑秃患者外周血中淋巴细胞的变化,找出其淋巴细胞变化的规律,笔者对2009年1月12月期间本院皮肤科44例斑秃患者和40例正常人的外周血中淋巴细胞采用流式细胞仪进行检测,并对结果进行统计分析,现将结果报告如下。1资料和方法1.1临床资料实验组为皮肤科门诊斑秃患者共44例,包括男21例,女23例,均具备斑秃的典型临床表现,临床确诊为斑秃。患者年龄分布在760岁,平均28.2岁。对照组为40例健康体检者,其中男21例,女19例,平均年龄为30.4岁。1.2方法1.2.1标本采集抽取外周静脉血2ml,采用EDTA-K2抗凝。1.2.2仪器与试剂仪器为美国BD(BectonDickinson)公司生产的FACSCalibur型流式细胞仪,采用双色组合标记抗体,对外周血中淋巴细胞亚群进行检测。荧光抗体分别为异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)标记的鼠抗人CD3+的单克隆抗体和藻红素(phycoerythrin,PE)标记的鼠抗人CD1+9、CD4+、CD8+、CD1+6,CD5+6的单克隆抗体。相同荧光标记的同种型免疫球蛋白(IgG1/IgG2)作为阴性对照。荧光抗体和溶血素均购自美国BD公司。1.2.3实验方法分别取100l抗凝血标本加入5支试管中,依次加入20l双标记鼠抗人单克隆抗体(CD3FITC/CD4PE、CD3FITC/CD19PE、CD3FITC/CD8PE、CD3FITC/CD16,56PE),阴性对照加入荧光标记的同种型免疫球蛋白;溶血:每管加入经过10倍稀释的1FACS溶血素2ml,室温避光放置10min后1500r/min离心5min,弃上清;每管加入2ml的PBS缓冲液,1500r/min离心5min,弃上清,然后加入0.5mlPBS缓冲液混匀;流式细胞仪检测,每管计数10000个细胞,记数荧光标记阳性的CD3+、CD1+9、CD4+、CD8+、CD1+6,5+6细胞,分别代表总T、B、TH、TS、NK细胞。1.3统计学方法运用t检验及方差分析对检测结果进行统计学处理。2结果44例斑秃患者和40例健康体检者的外周血淋巴细胞分群检测结果见表1。表1斑秃组和对照组的外周血淋巴细胞分群检测结果(xs)组别例数总T(CD3+)B(CD1+9)TH(CD4+)TS(CD8+)NK(CD1+6,5+6)TH//TS(CD4+/CD8+)斑秃组4462.709.0512.255.1631.204.4033.389.6019.158.561.040.41对照组4068.607.8211.802.5137.608.2325.507.3017.507.711.750.25t值3.2080.3934.3954.2570.9309.678P值0.0010.05P<0.001P<0.001P>0.05P<0.001结果显示44例斑秃患者外周血淋巴细胞中总T、TH细胞及TH//TS比值明显低于健康对照组,通过t检验统计分析后显示差异具有显著性(P<0.002),而TS细胞则显著高于健康对照组(P<0.001),而B细胞和NK细胞经t检验显示差异无显著性(P>0.05)。3讨论现代医学对斑秃的病因和发病机制研究尚未完全明了,可能与遗传、情绪应激、内分泌失调、自身免疫等因素有关。有报道显示,斑秃是一种T细胞介导的自身免疫性疾病[2],因为其常与一种或多种自身免疫性疾病并发,如桥本甲状腺炎、白癜风等。机体正常免

参考文献

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