银屑病患者外周血Th1、Th2和Th17细胞的检测

作者:丁振干,郭美丽,林小啸,丁细桃 刊名:中国麻风皮肤病杂志 上传者:王荣

【摘要】目的:检测寻常型银屑病(PV)患者外周血辅助性Th1、Th2和Th17细胞的水平及其在PV发病中的意义.方法:选取PV患者36例、正常对照20例静脉血标本,刺激5h后通过流式细胞术检测各种不同T细胞的含量.结果:PV组外周血IFN-γ+CD4+T细胞(Th1细胞)及IL-17A+ CD4+T细胞(Th17细胞)显著高于正常对照组(P值分别为0.005,0.001),患者组IL-4+CD4+T细胞及IL-10+CD4+T细胞(Th2细胞)与正常对照组比较无差异(P值分别为0.163和0.544).结论:PV患者外周血升高的Th1和Th17细胞可能迁移至局部皮肤参与炎症,发挥致病作用.

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银屑病是一种以角质形成细胞过度增生及真皮、表皮炎性细胞浸润为特征的慢性复发性炎症性皮肤病。目前银屑病的发病机制尚未完全明确,但众多研究发现患者皮损处Thl7、rrhZ和Thl细胞增多,并且这些细胞分泌的细胞因子IL一17A、IL一17F、IL一22、IFN一Y等水平升高,提示T细胞在PV发病中的重要作用。‘此外,有研究发现患者外周血T细胞亚群比例存在异常,2Thl/ThZ失衡,出现Thl偏移,Thl型细胞因子表达增多,并且Thl7细胞增多,调节性T细胞(Treg)出现数目减少及功能缺陷,’提示外周血T细胞比例异常可能参与致病。本实验对寻常型银屑病患者外周血Thl、Tll2和Thl7细胞水平进行检测,探讨其在银屑病发病中的意义。1材料与方法1.1研究对象我科门诊就诊寻常型银屑病患者36例,均为进行期患者,病程1一40年。其中男22例,女14例,年龄22~78岁,平均48.53土16.12岁。正常对照组20例,均为门诊健康体检者,男12例,女8例,年龄25一65岁,平均41.35士13.25岁。12主要试剂与设备PE一Cysanti一h~CD3,F伴Canti一humanCDS,APCanti一hulllallIFN一y,1Eanti一hulnanIL一4,1Eanti一hulllallIL一17A,1)Eanti一humanIL一10,Golgistop‘rM,Fixationz几rmeahilizatio。、olu-tion,几耐was肥btlf狡三:(BD外amllllgen公司)。PMA(佛波二醋),Ionomyein(伊诺霉素)(5191卫l公司)。10x红细胞裂解液(麦约尔公司)。RPMI1640细胞培养液(Gibe。公司)。FACSCalibur流式细胞仪(BD公司)。1.3标本采集与处理每例抽取外周静脉血ZmL,肝素抗凝。每2(x)肛L全血加人RpMI1640完全培养液(含ro%胎牛血清,200拜岁mL青霉素,200u/mL链霉素)及PMA(50ng/mL),Iono卿ein(1产g/mL)和Gol-gistop0.3拜L,在37,5%C仇孵育箱内孵育sh。加人lx红细胞裂解液,4避光放置巧面n,PBS液洗涤。加人PE一eysanti一humanCD3和FITCanti一hu-~CDS,4避光孵育30而n,PBS液洗涤。加人破膜液巧。样L,4避光反应30而n,1xPerm洗涤,分别加人APCanti一hulnanIF入一y,PEanti一humanIL一4,班anti一hulnanIL一17A,PEanti一h~IL一ro,4避光反应30而n,1xPerm洗涤加人300,,LpBS液,上机检测。1.4统计学方法采用SPSS13.0统计软件进行数据分析。以无士S表示,两组间比较采用非参数检验Mann一whitrieyu检验,尸<0.05为差异有统计学意义。2结果组别表IPV患者与对照组外周血IFN一下+CD4十T细胞、IL一17A+CD4+T细胞、IL一4+CD4+T细胞和nJ一10十C)+T细胞占C供十T细胞百分比例数】FN一了+e供+TIL一17A+e以+TxL一4+e以+TIIJ一10十Cl又+T对照组银屑病组Z值尸值11.91士8.5019.87士10.33一2.8040.仪)51.00士0.592.05士1.341.37士1.231.54士1.12一3.3180.0010.98土0.950.95土0.700.日)70.5440乙U勺几一1.3940.163784ChinJ玩prSkinDis.Nov2012,Vol.28,No

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