桑黄多糖通过P311/TGF-β1/Snail1通路抗糖尿病小鼠肾间质纤维化的研究

作者:黄倩;林佩璜;王梅爱;陈慧勤;郑丹丹;黄秋虹;张素萍;施子禄; 刊名:中药药理与临床 上传者:颜晓萍

【摘要】目的:观察桑黄多糖对糖尿病肾病(DN)模型小鼠肾间质纤维化的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:一次性尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)溶液120 mg/kg构建糖尿病小鼠模型,并将成模小鼠随机分为正常组、模型组、桑黄多糖40、80 mg/kg组、罗格列酮4 mg/kg组。小鼠连续灌胃给药12周后采血、留尿、留取肾脏组织。采用血糖仪检测空腹血糖(FBG)水平;采用磺基水杨酸-硫酸钠比浊法检测24 h尿蛋白(UP 24 h)水平;采用全自动生化分析仪测定血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平;Masson染色观察肾脏组织的病理变化;免疫组织化学法检测肾皮质中E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肾皮质中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)水平;Western blot检测肾皮质中组织金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)蛋白的表达及信号通路P311/TGF-β1/Snail1相关蛋白的表达。结果:与模型组比较,除桑黄多糖40 mg/kg组小鼠肾皮质中TIMP-2及P311蛋白表达无显著性变化外,其余剂量组FBG、UP 24 h、Scr和BUN水平、肾组织中胶原纤维沉积的比例、α-SMA蛋白表达及TIMP-2、P311、TGF-β1、Snail1的蛋白表达较模型组均明显降低,而E-cadherin蛋白表达和MMP-2水平均明显升高。结论:桑黄多糖可调节MMP-2/TIMP-2平衡,减轻糖尿病肾病小鼠肾间质纤维化,可能与抑制P311/TGF-β1/Snail1信号通路的激活有关。

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櫴櫴櫴櫴櫴 櫴 櫴 毷 毷 毷 实验研究 桑黄多糖通过 P311/TGF - β1/Snail1 通路抗糖尿病小鼠肾间质纤维化的研究* 黄 倩1,林佩璜1,王梅爱1,陈慧勤1,郑丹丹1,黄秋虹1,张素萍2,施子禄3** ( 1泉州医学高等专科学校,泉州 362100; 2浙江大学,杭州 310058; 3 福建医科大学附属泉州第一医院肾内科,泉州 362000) 摘 要 目的: 观察桑黄多糖对糖尿病肾病( DN) 模型小鼠肾间质纤维化的影响,并探讨其可能的作用机制。方法: 一次性尾静脉注射链脲佐菌素( STZ) 溶液 120 mg/kg 构建糖尿病小鼠模型,并将成模小鼠随机分为正常组、模型组、桑黄多糖 40、80 mg/kg 组、罗格列酮 4 mg/kg 组。小鼠连续灌胃给药 12 周后采血、留尿、留取肾脏组织。采用血糖仪检测空腹血糖( FBG) 水平; 采用磺基水杨酸-硫酸钠比浊法检测 24 h 尿蛋白( UP 24 h) 水平; 采用全自动生化分析仪测定血清肌酐( Scr) 和尿素氮( BUN) 水平; Masson 染色观察肾脏组织的病理变化; 免疫组织化学法检测肾皮质中 E-钙黏蛋白( E-cadherin) 和 α-平滑肌肌动蛋白( α-SMA) 蛋白表达; 酶联免疫吸附法( ELISA) 检测肾皮质中基质金属蛋白酶-2( MMP-2) 水平; Western blot 检测肾皮质中组织金属蛋白酶抑制因子-2( TIMP- 2) 蛋白的表达及信号通路 P311/TGF-β1/Snail1 相关蛋白的表达。结果: 与模型组比较,除桑黄多糖 40 mg/kg 组小鼠肾皮质中TIMP-2 及 P311 蛋白表达无显著性变化外,其余剂量组 FBG、UP 24 h、Scr 和 BUN 水平、肾组织中胶原纤维沉积的比例、α-SMA 蛋白表达及 TIMP-2、P311、TGF-β1、Snail1 的蛋白表达较模型组均明显降低,而 E-cadherin 蛋白表达和 MMP-2 水平均明显升高。结论: 桑黄多糖可调节 MMP-2/TIMP-2 平衡,减轻糖尿病肾病小鼠肾间质纤维化,可能与抑制 P311/TGF-β1/Snail1 信号通路的激活有关。 关键词 桑黄多糖; 糖尿病肾病; E-钙黏素; α-平滑肌肌动蛋白; 转化生长因子-β1; 锌指转录因子 糖尿病肾病( diabetic nephropathy,DN) 主要表现为慢性进行性肾间质纤维化,常常引起患者肾功能部分或者全部丧失。现已证实,肾小管上皮-间充质细胞转化( epithelial-mesenchymal-transition,EMT) 是导致 DN 肾间质纤维化主要细胞分子机制之一,因为在 DN 肾间质纤维化的研究中发现,超过 1/3 的间质成纤维细胞来源于局部肾小管上皮细胞发生的 EMT[1]。转化成长因子 β1( transforming growth factor-β1,TGF-β1) 是目前已经确定的引起 EMT 最有效、最重要的调控因子,也是目前公认的与肾纤维化最为密切的细胞因子,而 TGF-β1 主要是通过 TGF-β1/ Smads 信号通路介导 EMT[2],此外,也可以激活 p38 丝裂原活化蛋白激酶( p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK) 、核转录因子-κB、蛋白激酶 B( protein kinase B,PKB) 和 β-连环素等其他信号分子,而 p38MAPK 和 PKB 的活化均可间接阻断锌指转录因子 Sn

参考文献

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