Cyclin G1介导孕激素对子宫内膜上皮细胞增殖的负调控作用实验研究

作者:丁小玲;方明;岳利民;于海礼;袁东智;刘芳;张金虎;何亚平 刊名:西部医学 上传者:习羽

【摘要】目的探讨孕激素依赖的cyclin G1是否介导了孕激素对子宫内膜上皮细胞增殖的负调控作用。方法运用RNA干扰技术(RNAi)使cyclin G1基因表达沉默,观察孕激素所致小鼠子宫内膜上皮细胞增殖抑制作用的变化。针对cyclin G1基因设计并化学合成cyclin G1的小干扰RNA(G1-siRNA)和与cyclin G1序列无同源性的siRNA(con-trol-siRNA)作为阴性对照,两种siRNA均在其正义链的5’端加上荧光标记物Cy3。随机选取9只去势12天的成年雌性小鼠,连续2天皮下注射雌激素(100ng/次.只)。末次皮下注射雌激素19小时后,将Lipofectamin 2000与G1-siRNA(200nmol/ml)和control-si RNA(200nmol/ml)的混合液分别注射入同一小鼠的两侧子宫。5小时后,实验小鼠皮下注射孕激素(2 mg/只)。于孕激素注射24小时后,切取两侧子宫。冰冻切片后,荧光显微镜观察,以在子宫内膜上皮细胞中见到Cy3发出红色荧光作为判断RNA被子宫内膜层有效吸收的依据。确定siRNA被有效吸收后,应用免疫组化检测对照组和实验组子宫内膜中cyclin G1的表达和反映细胞增殖活性的增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果免疫组织化学染色结果显示,实验组子宫内膜上皮细胞内cyclin G1表达明显减弱,而PCNA的蛋白表达明显增强,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论cyclin G1至少部分介导了孕激素对子宫内膜上皮细胞增殖的负调控作用,为进一步探索和治疗子宫内膜癌提供了新的依据。

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