稳心颗粒对大鼠心室肌细胞跨膜动作电位的影响

作者:陈文韬;黄从新;郭凯;王晞 刊名:中国心脏起搏与心电生理杂志 上传者:郭太富

【摘要】目的观察稳心颗粒对大鼠左室壁跨膜动作电位的影响,从组织水平探讨稳心颗粒抗室性心律失常的机制。方法采用标准玻璃微电极技术,记录大鼠心室肌组织心内膜心肌细胞的跨膜动作电位(TAP)。在基础周长500ms刺激下,分别观察1,5,10,15,20g/L稳心颗粒对标准台式液灌流心肌和含哇巴因台式液灌流心肌TAP的影响。结果①不同浓度的稳心颗粒浓度依赖性的延长动作电位时程(APD)、90%复极化时间(APD90);对动作电位幅值(APA)无影响。②含哇巴因台式液灌流之后,各浓度稳心颗粒使APD、APD90延长,对APA无影响,15g/L的延长作用最显著。对于哇巴因诱发的早期后除极和心律失常,各浓度的稳心颗粒均有抑制作用。结论稳心颗粒对心室肌APD的延长和对触发活动的抑制是其抗心律失常作用的电生理基础。

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室性心律失常是临床最常见的心律失常之一,目前药物治疗仍然是控制心律失常的基础措施。现在使用的抗心律失常药物在发挥其抗心律失常作用的同时,在一定条件下都有致心律失常副作用[1]。中成药稳心颗粒由党参、黄精、三七、甘松、琥珀等组成,临床已证实稳心颗粒对心律失常有良好的调节作用,并且病人服药之后的依从性好,不良副反应少[2]。但是其发挥抗心律失常作用的机制目前仍不明确。笔者观察稳心颗粒灌流后以及对哇巴因灌流后心室肌组织条跨膜动作电位(TAP)的影响,探讨稳心颗粒抗心律失常的机制。1材料与方法1.1大鼠心室肌组织条制备健康SD大鼠(购于华中科技大学同济医学院实验动物中心),体重180300mg,雌雄不拘。用200U/ml的低分子肝素抗凝,约5ml。15min后快速击打动物头部致昏,经胸骨正中剪开胸壁,迅速取出心肺。立即将其置于4100%氧饱和的生理盐水中清洗,注意不要挤压心脏,以免形成血栓。然后置于0生理盐水的平皿中剪去双肺,选取左室游离壁做实验标本。将切取的组织条(约2cm1cm大小)置于100%氧气饱和的台式液灌流槽中[台式液成份(mmol/L):NaCl129、KCl3、NaHCO320、NaH2PO40.9、MgSO40.5、CaCl22.7、葡萄糖5.5,pH=7.30]。灌流约30min,待其显示稳定的电生理特性时开始实验(此时记录出的图形,基线稳定,干扰少或无)。1.2实验分组分成两组:正常台式液灌流组,哇巴因(购于sigma公司)灌流组(含有1.2mo/L哇巴因的台式液)。每组分别记录加药前以及稳心颗粒(由山东步长集团提供)1,5,10,15,20g/L作用后的TAP。每种情况分别有10个实验标本。能稳定记录TAP的心肌标本选为研究对象。1.3TAP的记录将制作好的心室肌组织条固定于灌流槽中,用100%氧气饱和的标准台式液恒速灌流,灌流速度维持在1.52ml/min。将双极银制电极(除尖端外其余部位绝缘),一端焊接导线与刺激器(SEN-7103,NihonKohdencorporation,Japan)相连,另一端放在心内膜面对标本进行刺激。刺激电压为两倍起搏阈值(25V),脉宽2ms,基础周长为500ms。经隔离器(SS-201J,JAPAN)输出,对大鼠左室标本进行刺激。采集的信号由玻璃微电极记录。玻璃微电极由微电极双步拉制器(PB-7,NARISHIGE)拉制,尖端充灌3mol/LKCl。电极与微电极放大器(MEZ-8201,NihonKo-hdencorporation,Japan)相连。记录出的TAP经放大后(Du-o773DualMicroprobesystem,WorldPrecisioninstruments,USA)输入MP100系统(MP100-AC,BIOPACSystemsInc.USA),转换后成像。用Acqknowledge3.7.2软件进行图像分析。正常台式液组记录正常台式液灌流心室肌组织标本后得TAP,然后分别加入不同浓度的稳心颗粒,记录TAP。哇巴因灌流组用含1.2mol/L哇巴因的台式液灌流心室肌组织标本,记录TAP,再分别用不同浓度的稳心颗粒干预,记录TAP。1.4观察指标TAP幅值(APA)。TAP时程(APD),90%的复极化时间(APD90)。早期后除极(EAD)和触发活动(TA)出现情况。上述指标分别在药物灌注前和灌注后30min记录。1.5统计分析数据以均数标准差表示,药物干预前后的比较采用配对t检验,不同浓度之间的比较采用单因素方差分析,计数资料以率或构成比表示。以P<0.05为差异有显著

参考文献

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