正交设计法优化野菊花多糖的提取工艺

作者:黄家利;张红梅;徐秀泉 刊名:中国实验方剂学杂志 上传者:宋晓

【摘要】目的:优化野菊花多糖的提取工艺。方法:采用单因素试验和L9(34)正交试验法考察了提取时间、提取温度和料液比对野菊花多糖得率的影响。结果:影响野菊花多糖得率的主次因素为提取温度、提取时间及料液比。最佳提取工艺条件为提取温度90℃,料液比1∶20,提取时间为4 h。结论:在此最佳工艺条件下野菊花多糖得率为3.32%。

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野菊花为菊科植物野菊ChrysanthemumindicumL、北野菊C.borealeMak.或岩香菊C.lavandulaefolium(Fisch.)Mak.的头状花序[1],性凉,味苦、辛,归肺肝经,具有疏风清热、消肿解毒的功效[2],主要含有挥发油[3]、黄酮[4]等有效成分,其中野菊花黄酮成分是珍菊降压片中的主要成分。近年研究发现,野菊花多糖具有清除活性氧自由基的活性[5],但对野菊花多糖的提取工艺国内外报道较少。本研究采用水提醇沉取方法,选取提取温度、提取时间及料液比3个因素,在单因素试验的基础上,采用L9(34)正交试验优化野菊花多糖的提取工艺,以期为深入开发利用野菊花资源提供试验基础。1材料野菊花购自河南宛西制药有限公司(批号080501),经鉴定为野菊C.indicum的干燥花蕾。乙醇,石油醚,葡萄糖,苯酚,浓硫酸及其他试剂均为分析纯;双蒸水为本实验室自制。UV-2102PCS型紫外分光光度计(尤尼柯上海仪器有限公司),,FD-1A-50冷冻干燥机(北京博医康),R-200旋转蒸发仪(Buchi公司),METTLERAE240分析天平(上海托利多-梅特勒仪器有限公司),TDL-5-A台式离心机(上海仪表集团)。2方法2.1野菊花的预处理将野菊花粉碎过40目筛,称取500g粉末,分别用石油醚、无水乙醇回流脱脂3次,常温鼓风干燥,待用。2.2野菊花多糖的提取精密称取经预处理后的野菊花干燥粉末20g,分别置于500mL圆底烧瓶中按设计的料液比加入蒸馏水,于恒温水浴中浸提,离心取上清液,提取液经旋转蒸发仪浓缩至原液的1/5,缓缓加入95%乙醇,使乙醇体积分数达80%,于冰箱中4静置12h,以3000rmin-1离心10min,沉淀依次用无水乙醇,丙酮,乙醚淋洗,得疏松粉末后加适量蒸馏水复溶,冷冻干燥,即得野菊花粗多糖。2.3野菊花多糖提取工艺优化选取提取温度、提取时间及料液比3个因素,在单因素试验的基础上,采用L9(34)正交试验优化野菊花多糖的提取工艺。2.4野菊花多糖的含量测定采用改良的苯酚-硫酸法[6]。精密称取野菊花粗多糖适量,用蒸馏水定容至25mL,采用改良苯酚-硫酸法在490nm处测定吸光度,计算多糖含量。3结果与分析3.1提取温度对野菊花多糖得率的影响以料液比115,时间为3h,考察不同提取温度对野菊花多糖得率的影响,结果见图1。从图1可以看出随温度升高,多糖得率逐渐提高,在90之前增加较明显,90时多糖得率最高达到3.02%。当温度继续升高,多糖得率有所下降,可能是温度过高,多糖会发生降解的缘故[7]。图1提取温度对野菊花多糖得率的影响3.2提取时间对野菊花多糖得率的影响以料液比115,温度为90,考察不同的提取时间对野菊花多糖得率的影响,结果见图2。从图2可以看出,随着提取时间的延长,多糖提取率逐渐增加,提取率在3h前增加较为明显,在3h后多糖提取率出现下降,说明野菊花中多糖已基本提取完毕,随着时间的延长,多糖也会发生降解。3.3料液比对野菊花多糖得率的影响以温度为90,提取时间为3h,考察不同的料液比对野菊花图2提取时间对野菊花多糖得率的影响多糖得率的影响,结果见图3。从图3可以看出,随着料液比的增加,多糖提取率随之增加,但在110120多糖得率增加没有显著性的差异。图3料液比对野菊花多糖得率的影响3.4正交设计试验根据单因素试验基础上按4因素3水平表进行L9(34)正交试验,各因素水平见表1,正交试验结果见表2,方差分析结果见表3。表1野菊花多糖提取正交设计水平A提取时间/hB提取温度/C料液比127011023

参考文献

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