鼓槌石斛种子萌发培养与小苗组培快繁技术研究

作者:蓝玉甜;刘世勇;罗玉婷;黄岚;李柱林;韦小路 刊名:安徽农业科学 上传者:白四红

【摘要】[目的]利用鼓槌石斛蒴果,通过无菌播种萌发发育成苗及小苗快繁技术试验研究,从而获得大量种苗。[方法]用鼓槌石斛种子通过无菌播种获得大量原球茎,分别转接到4组不同的诱导芽培养基上,筛选出最适合鼓槌石斛小苗分化和成长的培养基,以其设置以N6为基本培养基,添加浓度均为1.0、1.5、2.0 mg/L的NAA和IAA,筛选最适合鼓槌石斛小苗生根壮苗培养基。[结果]将鼓槌石斛种子在MS+6-BA1mg/L+10%香蕉汁+20 g/L蔗糖+6 g/L琼脂+1 g/L AC培养基上进行培养种子,种子萌发率达90%以上;最利于原球茎分化的培养基为N6+NAA2 mg/L+BA0.5 mg/L+10%香蕉汁+20 g/L蔗糖+0.5 g/L牛肉蛋白胨+5.8 g/L琼脂+0.5g/L AC,培养出的苗整齐度高,均匀;最佳生根壮苗培养基为N6+NAA 1.5 mg/L+10%香蕉汁+20 g/L蔗糖+5.8 g/L琼脂+1 g/LAC,苗生根数多、粗壮、整齐,叶浓绿。[结论]该研究结果为鼓槌石斛快速繁育技术提供了参考。

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鼓槌石斛(DendrobiumchrysotoxumLindl)为兰科石斛属附生植物,在我国主要分布于云南、广西、四川等省(区)[1-2],它既是重要的观赏植物,同时又是商品中药材石斛的重要原植物之一,以鲜茎或干燥茎入药,是我国民间习用药用石斛种类之一。鼓槌石斛除了具有生津益胃、清热养阴之功效外,传统上还用于治疗热病伤津、口干烦渴、病后虚热、阴伤目暗等[3]。鼓槌石斛茎干含有鼓槌菲、毛兰素等抗肿瘤活性成分[4-6],随着人们对鼓槌石斛的药用需求量增大,国内野生资源日趋减少,野生植株远远不能满足人们的日常需求,为了能在满足人们需求的同时又能保护野生资源,走可持续发展道路[7],就迫切需要进行人工栽培途经提供原料,因此笔者对野生鼓槌石斛种子进行人工快速繁殖研究,对兰科自然保护区兰花资源保护具有重要意义,同时又为药用石斛产业化发展栽培提供可靠的繁育技术指导。1材料与方法1.1材料利用广西雅长兰科自然保护区野外仿生种植鼓槌石斛植株在开花期间进行人工授粉,从授粉之日起6个月后,蒴果可完全成熟,取下蒴果作为外植体进行无菌种子培养。1.2方法1.2.1材料消毒。摘取成熟蒴果后,先用自来水冲洗果表面;然后用75%的酒精棉球擦拭蒴果表面,用接种刀将果柄去掉及果面多余的外果皮,用刀削时要小心种子,不能将种子弄裂;接着用0.1%升汞浸泡20min,再用无菌水冲洗5次,每次35min,最后用无菌滤纸吸干蒴果表面水分,放置备用。1.2.2播种及培养条件。蒴果消毒好之后,在超净工作台沿果中缝线纵向切开,利用无菌镊子夹起蒴果均匀地将种子撒播在每瓶培养基表面上,培养条件为前7d弱光培养,后期光照强度在15002000lx,每天1012h光照时间,培养温度(252)。1.2.3培养基配方。1.2.3.1种子无菌萌发培养基。种子萌发培养基:MS+BA1mg/L+NAA0.5mg/L+香蕉汁100g/L+肌醇100mg/L+蔗糖20g/L+AC1.5g/L+琼脂5.8g/L;pH值5.4。1.2.3.2原球茎分化小苗培养基。利用MS、1/2MS、N6、B54组为基本培养基,每组均分别附加2mg/LNAA和0.5mg/LBA激素,将大小一致的原球茎分别转接到()()()()培养基中(表1),研究不同培养基成分对鼓槌石斛原球茎分化的影响及小苗后期生长情况,每个培养瓶接种100个原球茎体,重复10次,培养条件为光照2000lx,12h光照,培养温度(252)。1.2.3.3生根壮苗培养基。原球茎分化成苗后,分别转到以N6为基本培养基,添加2组不同激素浓度,主要研究3种不同浓度NAA和IAA对苗生根壮苗的影响。因此,选取状态一致的小苗接种到(A)(B)(C)(D)(E)(F)6种生根培养基中(表2),每个培养瓶接20株小苗,重复10次,培养60d后统计生根率及生长结果,培养条件为光照3000lx,12h光照,培养温度(252)。2结果与分析2.1鼓槌石斛种子萌发培养及成苗过程取成熟种胚接种表1原球茎分化小苗培养基组成Table1Thecompositionsofmediumforprotocorm-likebodydiffer-entiation培养基Medi-um组成成分Ingredients其他营养条件OthercompositionsandconditionsMS+NAA2.0mg/L+BA0.5mg/L10%香蕉汁+20g/L蔗1/2MS+NAA2.0mg/L+BA0.5mg/L糖+0.5g/L牛肉蛋白B5+NAA2.0mg/L+BA0.5mg/L胨+5.8g/L琼脂+0.5N6+N

参考文献

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