石斛兰“绿色星辰×出水芙蓉”杂交种子无菌萌发与组培快繁研究

作者:符岸军;李娟玲;李劲松;张勇;刘国民 刊名:安徽农业科学 上传者:佟方硕

【摘要】[目的]研究石斛兰"绿色星辰×出水芙蓉"杂交种子无菌萌发与组培快繁。[方法]以"绿色星辰"为母本、"出水芙蓉"为父本进行杂交,并对其杂交种子进行了离体培养和组培快繁。[结果]石斛兰杂交种"绿色星辰×出水芙蓉"的F1代种子在改良Knudson培养基上(附加1.00 mg/L 6-BA、1.00 mg/L NAA和10.0%熟香蕉泥)可获得理想的无菌萌发效果,且原球茎在该培养基上也能较快增殖。以1/2MS最适合于该杂种石斛兰F1代无菌实生苗的组培快繁;8种供试培养基用于增殖培养的效果为:1/2MS>MS>1/3MS>1/4MS≈N6>改良Knudson≈B5>H。NAA用于杂种石斛兰"绿色星辰×出水芙蓉"F1代无菌实生苗的生根壮苗效果要优于IBA;NAA的推荐浓度为2.00 mg/L。[结论]为今后的新品种选育提供了育种材料。

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兰科(Orchidaceae)是植物界4个特大科之一,含有869~888属,18500~21400种,在植物界居第2位[1]。我国约有兰科植物171属,1247种,以及许多亚种、变种和变型[2]。其中较多兰花种类系我国特有,或具有非常重要的观赏价值和药用价值。石斛属是兰科中的第2大属,全世界有1500~1600个原生种,主要分布于亚洲热带和亚热带、澳大利亚以及太平洋岛屿等地区。我国的石斛兰有74种2变种,主要分布于西南、华南、台湾等热带、亚热带和秦岭以南地区[1,3]。由于花形花姿优美、花色鲜艳、种类繁多以及花期长,石斛兰深受各国人们的喜爱,被誉为“四大观赏洋兰”之一,许多国家还将其定为“父亲节之花”。石斛兰既可用作高档的插花,也可用于菜肴上碟的装饰花材,还可用作贵宾胸花、花环、新娘捧花、花车装饰等,其用途极为广泛,实用价值很高。世界经济的发展和人们生活水平的不断提高有力推动了观赏石斛兰的生产和消费,观赏石斛兰的育种技术已成为研究者关注的重点和热点。当今许多国家都广泛栽培石斛兰,栽培中心为东南亚,其中以泰国产量最大,消费市场主要在日本、欧美等发达国家[4]。“绿色星辰”和“出水芙蓉”是2个不同花色的石斛兰优良栽培品种。其中,“绿色星辰”既可作为切花栽培,又可作为盆花栽培,其花瓣呈黄绿色;“出水芙蓉”是一个优良的盆花品种,其花瓣大部分为白色,花的中央部分呈紫红色。这2个品种均是近年从国外引入海南省的,颇受兰花企业和兰花爱好者的欢迎。为此,笔者以“绿色星辰”为母本、“出水芙蓉”为父本进行杂交,并对杂交种子进行了离体培养和组培快繁,旨在为今后的新品种选育提供育种材料。1材料与方法1.1材料取石斛兰杂种“绿色星辰出水芙蓉”F0代的八成熟蒴果,通过植物组织培养的常规方法[5]进行表面消毒后,取其中的杂交种子作为外植体材料。1.2方法1.2.1材料表面消毒与接种。将石斛兰杂种“绿色星辰出水芙蓉”F0代杂交蒴果从植株上摘下后,先用自来水冲洗干净,再置于5%洗洁精溶液中摇洗2次,每次摇动5min,取出蒴果用自来水洗净。沥干水后,在超净工作台上先用75%乙醇消毒3min,再用0.2%HgCl2消毒10min,最后用无菌水冲洗4~5次,沥干备用。接种时,在无菌不锈钢盘上将经过表面消毒的蒴果材料切除两端各约0.5cm,然后将中段纵向切开。左手持无菌镊子夹住一块材料,右手持无菌手术刀在培养瓶口上方将蒴果材料的种子轻轻割下,令其均匀接种到培养基表面。1.2.2培养基的配制和灭菌及培养条件。各种培养基的配制与消毒灭菌均按照植物组织培养的常规方法[5]进行。材料接种后置于(252)培养室中培养,以日光灯为光源,光照强度为2000~2500lx,每天光照10~12h。1.2.3培养基配方。1.2.3.1种子无菌萌发培养基。培养基配方为:改良Kund-son无机盐+10000mg/L肌醇+0.50mg/L烟酸+1.00mg/L盐酸硫胺素+0.50mg/L盐酸吡哆素+200mg/L甘氨酸+100mg/L6-BA+1.00mg/LNAA+2.00%蔗糖+1000%熟香蕉泥+0.70%琼脂,pH值5.8。1.2.3.2增殖培养基。用于增殖培养的8种供试基本培养基分别为MS、1/2MS、1/3MS、1/4MS、B5、N6、改良Knudson和H。除基本培养基不同外,8种供试增殖培养基中的其他成分完全相同,即均为:10000mg/L肌醇+050mg/L烟酸+100mg/L盐酸硫胺素+050mg/L盐酸吡哆素+2.00mg/L甘氨酸+200mg/L6-BA+0.25mg/LNAA+250%蔗

参考文献

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