节杆菌菌株菱形弧16 VKPM的Ac-1988 - 析油和石油产品

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【标题】节杆菌菌株菱形弧16 VKPM的Ac-1988 - 析油和石油产品

【外文标题】Штамм arthrobacter rhombi arc 16 вкпм ас-1988 - деструктор нефти и нефтепродуктов

【来源链接】http://www.findpatent.ru/patent/262/2624063.html

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本发明涉及生物技术,微生物学,生态学,环境保护领域。细菌菌株节菱形ARC 16能够和石油产品的降解。保藏号为VKPM交流,1988年存放在工业微生物俄罗斯国家收集菌株节菱形。该菌株可用于海水贮存在海岸线从4的温度通过油和石油产品污染的纯化至+ 20℃和30克/升的盐度。本发明改进了净化水的效率水库油和油的温度从海岸线+4到+ 20℃和30克/升的盐度。 3 pr。 发明内容本发明涉及生物技术和微生物学,生态学,环境领域,并且代表一种新的细菌菌株节菱形ARC 16 VKPM的Ac-1988具有降解油和石油产品的能力的技术领域。该菌株可用于石油和石油产品的温度从4污染至+ 20℃,将30g盐度的海水贮存海岸线的纯化/ l.Uroven技术人员从现有技术是已知的菌株红球菌sp.-析构石油烃(俄罗斯专利第2518349号,优先权11/04/2013,2014年6月10日公布)。该菌株在+ 30℃的温度下显示出高度的烃降解。然而,该菌株不能够在低利用率temperaturah.Izvesten产碱假单胞菌菌株B-1的生产烃的,利用油,燃料油,煤油,萘烷,十五烷,十四烷,十六碳烯,fenildekan,姥鲛烷在第5天已在20-30℃下的能力该菌株有效地进行烃的宽浓度范围内(RF专利2133770,1998年3月25日优先权,公开。1999年7月27日)的生物降解。该菌株的一个缺点还在于它没有在低temperaturah.Izvesten微小杆菌mexicanum菌株VKPM B-11011利用油的污染,具有快速处理的油,柴油,机油,天然气液体的能力,并用于清洁土壤和水的污染的油和石油产品,一个宽的温度范围从4至+ 37℃(RF专利№2523584,优先权2013年3月27日,公开。二零一四年七月二十零日)。应变缺点是,它不能够在高盐度水处置油污染的30克/ l.Naibolee最接近的类似物是应变红串红球菌,保藏号VKM的Ac-2613D沉积,用于净化淡水,微咸水和海对象和沉积物并在从2的温度至+ 25℃,盐度至2.7%(专利RF 2553336 20/08/2013公布于2015年6月10日)提供的油在水体的破坏。本发明的一个缺点是,该菌株利用在营养丰富的烃(介质进入蛋白胨5g / l的蔗糖和15g / L的)。下实际情况,营养物质的烃类污染物的利用率显著snizheno.Raskrytie izobreteniyaZadachey本发明是提供一种能够在温度从4执行的油和石油产品的降解至+ 20℃的细菌菌株和30克/ l.Postavlennaya问题盐度在于解决获得的菌株节菱形ARC 16 VKPM的Ac-1988,能够执行的油和石油产品在水中的降解,这可以用于水域水库,海岸线的纯化的, agryaznennyh油和矿物油,在从4至+ 20℃的温度和盐度为30g / l.Shtamm从城市区摩尔曼斯克2014年6月3日一年中的端口分离的。该菌株已保藏在工业微生物FSUE GosNIIgenetika在俄罗斯国立保藏中心(VKPM,莫斯科,1 Dorozhny PR。,1),登记号为VKPM的Ac-1988.Identifikatsiya应变下它是通过研究其文化,形态和生理生化特征进行,以及通过研究16S基因序列rRNK.Poluchenny菌株具有下列形态priznakami.Kulturalno priznaki.Kolonii淡黄色,圆形,有光泽,光滑,凸的,具有平滑的边缘,一个一个结构,柔软的一致性。菌落大小从0.5到1.5毫米。小型活动杆,尺寸0.8-1.2×1.0-2.5μm。革兰氏染色polozhitelnaya.Fiziologo生化priznakiShtamm生长在温度为4至+ 20℃,在有氧条件下。最佳增长为+4至+ 10°С。它在pH 4.0-8.0下生长。它生长在浓度和液体营养的培养基上,NaCl含量为30克/升。能够作为唯一碳源的液体培养基中生长烃和1 energii.Shtamm支持传代培养下列组成,克/升在固体介质modPCA每14天的:KH 2 PO 4 - 1.5; KH2PO4 - 0.75; MgSO4 = 1.0; (NH4)2SO4-4.0;氯化钠 - 30;酪蛋白水解物 - 5.0;酵母提取物 - 2.5; D-葡萄糖1.0;琼脂-14; pH7.0或液体培养基No.1以下组成,g / l:K2HPO4-1.5; KH2PO4 - 0.75; MgSO4 = 1.0; (NH4)2SO4-4.0;氯化钠 - 30;酪蛋白水解物 - 0.5;酵母提取物 - 0.1; pH7.0。 1:作为烃基板中的比率1使用商业油Vozeyskogo字段(37.9°API的密度,0.66%的硫含量,其特征在于作为重,粘性,高树脂和沥青质)和柴油燃料的混合物的液体介质obemu.Takzhe应变可以储存在+ 6±2℃在冻干状态使用脱脂乳作为节菱形ARC的菌株的保护sredy.Osuschestvlenie izobreteniyaPrimer 1.分离和培养16 VKPM的Ac-1988.Shtamm从图像分离的水土沿海港口城市摩尔曼斯克线2014年6月3日。将质量为5±2g的土壤样品加入100ml 1号营养培养基中。在轨道振荡器(130rpm)上在+ 4℃的温度下进行培养。培养时间为7天。将得到的储存培养物以10ml的量加入100ml营养培养基#1中。至少进行了30次累积培养。在媒体modPCA进行菌株分批培养的分离,进一步得到纯的培养物在培养基中№1.Primer2.调查油氧化的应变节菱形ARC 16 VKPM的Ac-1988.Shtamm的生长液体培养基上№1活性培养,加入作为接种在100毫升营养培养基#1中。作为对照,使用不含培养物的营养培养基。在+的温度4℃7天,然后用根据GOST 31953-2012己烷的烃萃取,130转/分钟培养后,色谱评价上摩擦进行碳氢化合物DSA 100仪器配备有微毛细管柱DB-1ms以上,载气 - 氦,气体流速 - 39毫升/分钟,探测器 - PID,探测器温度 - 320°С。测量在60至320℃的恒温器中的温度梯度条件下进行。使用该软件的OpenLAB CDS分析结果进行处理(安捷伦).Summarnaya消退和中等沸点馏分是内培养7天后至少50%的在+ 4℃和30g的盐度/ l.Primer 3.制备制剂的方法KH 2 PO 4:菌株节菱形ARC 16 VKPM的Ac-1988.Shtamm节菱形ARC 16 VKPM的Ac-1988在+ 4℃下7天生长PCA介质上,被引入到下列组合物中,克/升的液体培养基中的基础上 - 1.5; KH2PO4 - 0.75; MgSO4 = 1.0; (NH4)2SO4-4.0;氯化钠 - 30;酪蛋白水解物 - 5.0;酵母提取物 - 2.5; D-葡萄糖1.0; pH7.0。在+ 10℃下进一步培养在轨道振荡器上3天,以109 CFU / ml的最终效价。在所得细胞在营养培养基中的悬浮液中,引入保护性培养基(10%脱脂奶粉)。此外,通过冷冻干燥将所得液体生物质冷冻并脱水。应变节菱形ARC 16 VKPM的Ac-1988与养分预混物混合的干生物质在1之比(脱脂奶粉):10.Takim,将得到的菌株,能够执行的油和石油产品的降解的在+ 4℃至+ 20° ℃和30克/升的盐度,能够在液体介质中与烃类成长为唯一碳源和energii.Shtamm节菱形ARC 16 VKPM的Ac-1988在从4℃至+ 20℃的油和石油产品在水性介质中降解盐度为30克/升。