拮抗细菌对烟草黑胫病的防治效果研究

作者:李祝;万科;丛铭;张传萍;施渺筱 刊名:湖北农业科学 上传者:牛旭

【摘要】采用温室盆栽试验测试5株芽孢杆菌属生防细菌对烟草黑胫病的拮抗作用。结果表明,拮抗细菌芽孢杆菌1205对苗期烟草黑胫病有较稳定的防治效果,其分泌物还有促进烟株生长的作用,经鉴定1205菌株为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。

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烟草黑胫病[Phytophthoraparasiticavar.nico-tianae(BredadeHean)Tuker]俗称烂腰病、黑根病,是一种常见的土传真菌病害。烟草黑胫病在苗床及大田中均可发生,尤其是在高温高湿、多雨年份及低洼地区,该病发展蔓延快,在1~2周内可造成整块烟田毁灭,导致绝收[1,2]。随着生物技术的发展和相关研究的深入,生物防治成为烟草黑胫病的研究重点,特别是在利用有益微生物进行病害防治等方面[3-7]。本研究对筛选出来的5株生防细菌进行盆栽防效试验,以研究其对烟草黑胫病的拮抗作用。1材料与方法1.1材料烟草黑胫病菌病原菌烟草疫霉(PhytophthoraparasiticaGzufp-9)由贵州大学生命科学院真菌资源研究室提供。拮抗细菌为芽孢杆菌1107、7403、1205、1601、5801菌株。烟草品种为毕纳1号。1.2盆栽试验方法1.2.1烟草育苗采用漂浮育苗法,育苗前将浮盘和盛水方盘进行消毒,检查盘孔是否堵塞,用松散基质填满孔穴,用手指轻微下压至有实落感,约下压1cm,然后装满刮平露出盘面孔格,每孔播种毕纳1号种子2~3粒,播种后不再盖基质,立即放入盛有适量水的方盘内。待出苗具备2片真叶时即可进行间苗,确保每孔内有1株均匀一致的烟苗。在烟苗已具有4叶1心,苗高3~4cm时剪叶,剪去超过盘孔的根系控制大苗生长,促使小苗生长。后期剪叶两次,促进茎部的生长,达到炼苗的目的[8]。移栽,每盆1株,10d后进行处理。1.2.2烟草疫霉孢子悬浮液的制备利用已分离出的烟草疫霉菌菌株Gzufp-9,参照烟草疫霉孢子悬浮液制备方法[9]制备烟草疫霉孢子悬浮液,孢子浓度为104个/mL。1.2.3拮抗细菌接种物的制备在NA平板上将分离得到的拮抗菌株1107、7403、1205、1601和5801活化,取两环活化的培养物分别接入盛有100mLNA培养液的250mL三角瓶中,28、160r/min培养3d,得到拮抗菌株悬浮液。1.2.4接种方法病原菌接种采用王丽珍[10]的方法,将烟草疫霉孢子悬浮液灌根接种于烟株根部土壤中。拮抗细菌采用灌根接种法,将已经制备好的浓度为1108个/mL拮抗菌发酵液灌根,接种于烟株根部土壤中。选择长势大小相近,苗龄40d的烟苗,移栽到盆内,每盆1株,移栽10d后接种,试验设6个处理,每个处理15株,设3次重复。1处理组1:在烟株移栽10d后,首先接种拮抗菌发酵液10mL,10d后再接种烟草黒胫病病原菌游动孢子悬浮液(104个/mL)10mL;2处理组2:在烟株移栽10d后同时接种烟草黒胫病病原菌游动孢子悬浮液(104个/mL)10mL和拮抗菌发酵液10mL;3处理组3:在烟株移栽10d后,首先接种烟草黒胫病病原菌游动孢子悬浮液(104个/mL)10mL,10d后再接种拮抗菌发酵液10mL;4发病对照组:在烟株移栽10d后只接种烟草黒胫病病原菌游动孢子悬浮液(104个/mL)20mL,不接种拮抗菌;5拮抗菌对照组:在烟株移栽10d后接种拮抗菌发酵液20mL,不接种病原菌;6空白对照组:在烟株移栽10d后接种清水20mL。1.3小区试验在贵州省毕节市黔西县进行田间试验,所有试验小区的栽培条件均匀一致,试验期间管理按照常规进行,拮抗菌田间药效试验小区按随机排列的方式进行。1.3.1施药方法在烟株移栽前采用拮抗菌发酵液喷洒方式施用到土壤中,移栽后拮抗菌以灌根的方式接种到烟株根部。选用生产中常用的器械,菌种发酵采用泰斯特6000型培养箱,记录所用器械的类型和操作条件的全部资料。菌种的施用应保证接种量准确,分布均匀。接

参考文献

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