罗氏沼虾诺达病毒单克隆抗体的制备及应用

资源类型: 资源大小: 文档分类:农业科学 上传者:唐军

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【作者】 刘问  钱冬  吴建翔  邵健忠 

【关键词】罗氏沼虾 肌肉白浊病 罗氏沼虾诺达病毒 单克隆抗体 三抗体夹心酶联免疫吸附测定 

【出版日期】2005-08-30

【摘要】罗氏沼虾肌肉白浊病(whitish muscle disease of Macrobrachium rosenbergii)是一种发生在罗氏沼虾苗种阶段的流行病,发病虾苗出现肌肉白浊、白斑或白尾症状,死亡率高达60%以上。作者所在实验室在确定其病原是罗氏沼虾诺达病毒(Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV)的基础上,用MrNV免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,用间接ELISA筛选阳性孔,经有限稀释法克隆,得到12株能特异分泌抗MrNV的单克隆抗体(Mab)的杂交瘤细胞。注射小鼠,制备腹水单克隆抗体,ELISA效价为1∶105~106。亚型鉴定结果表明,有6株单抗为IgG1型,4株单抗为IgG2a型,2株单抗为IgG2b型。12株单抗与对虾白斑综合征病毒(WSSV)和桃拉综合征病毒(TSV)均无交叉反应。挑选效价高的腹水单抗2B5,建立了检测罗氏沼虾诺达病毒的三抗体夹心酶联免疫吸附测定(TAS-ELISA)法,该方法检测灵敏度达0.98ng左右。Wesrternblot分析表明,2B5能与MrNV43kD的外膜蛋白特异性结合。

【刊名】水产学报

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