奶牛乳腺组织两种不同培养体系的比较

资源类型: 资源大小: 文档分类:农业科学 上传者:王二伟

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【作者】 赵学军  吴慧慧  张才乔  刘建新  吴跃明 

【关键词】组织培养 旋转培养法 贴壁培养法 乳腺 奶牛 

【出版日期】2005-08-30

【摘要】以液氮冷冻泌乳奶牛乳腺组织为研究材料,对奶牛乳腺组织的旋转培养法与贴壁培养法进行了比较研究。乳腺组织的培养条件为:DMEM/F12培养液中含2μg/mL氢化可的松、5μg/mL转铁蛋白、10μg/mL胰岛素和10%的胎牛血清。通过台盼蓝染色观察(旋转培养法)、培养组织观察(贴壁培养法)、测定MTT二甲基噻唑二苯基四唑嗅盐活性和基因组DNA降解成为1000bp以下核苷酸片段量来比较两种方法的优缺点。结果发现,旋转培养法在120h后组织和细胞成活率都在80%以上,MTT与基因组DNA降解值显示在72h内组织活性最高;贴壁培养法组织、细胞在24h开始贴壁,到48h后完全贴壁成活,72h后组织具有明显分泌活性,MTT值与基因组DNA降解值显示,72h以后奶牛乳腺组织已表现出分裂增殖能力,组织死亡率明显下降,96h后培养组织的增殖能力与死亡率都达到稳定状态。奶牛乳腺组织贴壁和旋转两种培养方法在72h内都可以保持奶牛乳腺组织基本活性。

【刊名】农业生物技术学报

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