广西壮族人群类风湿关节炎患者HLA-DR53、DR4基因及其与抗-CCP抗体的相关性研究

作者:揭旭日;王小超;陆翔;黄丹 刊名:右江民族医学院学报 上传者:王艳萍

【摘要】目的探讨广西壮族类风湿关节炎(RA)患者人类白细胞抗原(HLA)-DR53、DR4基因发生的频率数及其与抗-CCP抗体相关性。方法研究对象为49例RA患者及54例健康体检者,采用PCR-SSP法检测HLA-DR53、DR4基因;ELISA法检测抗-CCP抗体。结果 1DR4基因出现频率在RA患者与健康者相当(P>0.05)。2DR53基因出现频率在RA患者明显高于健康者(P<0.05)。3HLA-DR4基因阳性患者更易出现抗-CCP抗体阳性(P<0.05)。结论 1我区壮族人群DR4与RA的发病无相关。2DR4基因阳性RA患者更易出现抗-CCP抗体阳性。3DR53基因阳性RA者与抗-CCP抗体阳性无相关。

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类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)是所有炎症性关节炎中最为常见的免疫性疾病,全球人群患病率为0.5%~1.0%,我国患病率为0.32%~0.36%。人类白细胞抗原(hu-manleukocyteantigen,HLA)分子的基因定位于6号染色体的主要组织相容性复合物区域内,分为、和三类基因,HLA-类基因含有DR、DQ和DP三个亚区。随着研究的不断深入发现,不同地域、不同民族的患者,HLA-DR/DQ基因与RA有关联性。本实验我们应用聚合酶链式反应-序列特异引物(PCR-SSP)方法对广西壮族RA患者、健康人群的HLA-DR53、DR4基因检测,了解壮族人群DR53、DR4基因表达情况,并对壮族人群RA患者DR53、DR4基因与抗-CCP抗体的相关性进行研究,了解壮族人群RA患者DR53、DR4基因表达与临床的相关性。1对象和方法1.1研究对象1研究组:RA病人49例,年龄15~72岁,平均(475.6)岁,其中男18例,女31例,均为右江民族医学院附属医院风湿科2009~2013年2月份确诊的壮族RA患者。122对照组:健康成年人54例(与RA患者无亲戚关系),均为壮族人群,年龄18~66岁,平均(424.5)岁,其中男28例,女26例,性别及年龄分布与患者组相当。各检查对象之间无血缘关系。1.2仪器、试剂和方法仪器分别有ABI9700PCR扩增仪(美国PE公司),电泳仪(日本产),电泳槽(美国TexasBioGene公司),凝胶成像系统(北京市亚力恩机电技术研究所),BNII型特定蛋白仪(美国德灵公司),宝特ELX-800酶标仪等。试剂采用Taq酶(立陶宛Fermentas公司),MorganTMHLA-DR4SSP分型试剂盒(美国TexasBioGene公司),EZHighTMDNA提取试剂盒(美国TexasBioGene公司);抗-CCP抗体采用上海富莼科芯生物有限公司提供试剂盒。以酶联免疫吸附(ELISA)法测定患者血清抗-CCP抗体水平,>25RU/ml为阳性。具体方法均严格按说明书进行操作。1.3统计学方法采用SPSS11.5软件行统计学处理,计数资料用2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1RA的HLA等位基因检测结果RA患者的HLA-DR4和健康者的HLA-DR4数目相当,但HLA-DR53基因频率结果高于健康组,见表1。表1RA患者的HLA-DR4和HLA-DR53基因频率组别nHLA-DR4基因数基因频率(%)HLA-DR53基因数基因频率(%)RA组491020.411938.78健康组5459.261018.52RR5.512.7822.575.21P0.110.022.2RA的抗-CCP抗体检测结果RA患者抗-CCP抗体阳性率高于健康人群;DR4阳性RA患者抗-CCP抗体阳性率高于DR4阴性患者,见表2。表249例RA患者抗-CCP抗体检测结果(n,%)组别n抗-CCP抗体阳性抗-CCP抗体阴性2P健康组542(3.70)52(96.30)RA组4933(67.35)16(32.65)46.38<0.01DR4阳性RA组107(70.00)52(96.30)5.98<0.01DR4阴性RA组399(23.08)30(76.92)DR53阳性RA组1912(63.16)7(36.84)0.250.62DR53阴性RA组3021(70.00)9(30.00)3讨论HLA-DR、DQ、DP为经典的类基因,许多国家和地区研究发现DR4与RA的发病相关[3-4],国内李兴福[5]、贺桂凤[

参考文献

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