糖尿病血糖波动动物模型建立的初探

作者:盖春柳;赵静如;陈晓隆 刊名:国际眼科杂志 上传者:赵振余

【摘要】目的:通过腹腔注射葡萄糖的方法建立血糖波动动物模型,以模拟糖尿病患者的血糖波动情形,为在体研究血糖波动的损伤机制提供实验基础。方法:SD大鼠随机分为四组:正常对照组(NC)、正常波动组(NF)、糖尿病模型组(DM)和糖尿病波动组(DF)。首先腹腔注射STZ诱导糖尿病模型,成模后NF和DF两组大鼠每天3次腹腔注射一定量的葡萄糖造成血糖波动,每2wk进行一次全天血糖检测,根据血糖值绘制"时间-血糖浓度"曲线,观察血糖波动的情况。并计算平均血糖水平(MBG)、平均血糖水平标准差(SDBG)、最大血糖波动幅度(LAGE)和Sclichtkrull Mz值(M值),从四个不同方面来评价血糖的稳定性。结果:NC组大鼠全天血糖在正常范围内,平稳无波动,NF组大鼠血糖在5~10mmol/L范围内波动,DM和DF组大鼠血糖维持在较高水平(>20mmol/L),DM组血糖波动不大,DF组血糖波动明显;NF和DF两组大鼠的血糖变化明显而且规律,波动曲线比较稳定。NF、DM与DF三组大鼠评价血糖稳定性的各项指标均较NC组有明显的增高,DF组升高更显著,多组及两组间比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:通过人为腹腔注射葡萄糖的方法能形成明显的血糖波动,可用来模拟糖尿病患者的血糖波动情形,此方法操作简单、损伤小、可重复性好,为在体研究血糖波动的损伤机制以及糖尿病并发症的发病机制提供了实验基础。

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0引言糖尿病是以慢性高血糖为特征的代谢紊乱,其对靶器官的损伤主要通过慢性持续高血糖和慢性波动性高血糖(血糖波动)两种方式体现[1]。以往对糖尿病病因的研究多是注重慢性持续高血塘,但随着临床观察和科学研究的不断深入,慢性波动性高血糖对糖尿病患者的影响越来越受到重视。目前关于在体血糖波动动物模型尚无经典式报道。本实验通过每天3次腹腔注射葡萄糖的方法达到血糖波动,观察期间每2wk监测一次大鼠全天血糖变化,对大鼠血糖的稳定性进行评估,从而对此种建立血糖波动动物模型的方法进行评价,为在体研究血糖波动的损伤机制及与糖尿病并发症之间的关系提供相关的动物模型。1材料和方法1.1材料1.1.1实验动物与分组健康雄性SD大鼠40只,鼠龄12周,体质量180~220g,无眼疾,由中国医科大学附属盛京医院实验动物中心提供,由专人分笼喂养,严格遵守清洁动物级大鼠喂养条件。大鼠随机分为四组:正常对照组(NC)、正常波动组(NF)、糖尿病模型组(DM)、糖尿病波动组(DF),每组10只作为实验样本。实验动物及实验所用条件符合国家科学技术委员会的《实验动物管理条例》。1.1.2主要试剂及仪器链脲佐菌素(streptozocin,STZ,美国Sigma公司);50%葡萄糖(glucose,20g/10mL,上海化学试剂公司)。拜安捷2血糖仪和血糖监测试碟(美国拜耳医药保健有限公司)。1.2方法1.2.1血糖波动模型的建立所有大鼠适应性饲养1wk,禁食12h后称重,DM和DF组大鼠用新鲜配置的1%STZ溶液,按60mg/kg剂量一次性腹腔内注射,诱导建立糖尿病大鼠模型,NC和NF组大鼠则腹腔注射等体积的无菌柠檬酸盐缓冲液。注射30min后自由进食进水,72h后尾缘静脉取血,血糖仪测随机血糖16.7mmol/L者,稳定5d即可作为糖尿病模型建模成功的标准。将糖尿病模型成功的大鼠随机分成DM和DF组。NF和DF组的建立方法是:每天3次腹腔注射50%葡萄糖溶液2g/kg,注射时间分别为800、1200和1600。NC和DM组按照上述的方法腹腔注射等量的生理盐水。每2wk测量一次体质量,根据体质量的变化调整注射葡萄糖和生理盐水的量,连续观察8wk。 1.2.2绘制“时间-血糖浓度”曲线每2wk进行一次大鼠全天血糖的检测:即各组大鼠在每次注射前、注射后30min及夜间取血测血糖,共监测7个时间点的血糖,分别为800,830,1200,1230,1600,1630和2000时。根据第4,8wk的血糖检测值绘制“时间-血糖浓度”曲线,观察血糖波动的情况。1.2.3血糖稳定性的评估根据全天的血糖值计算各组大鼠平均血糖水平(MBG)、平均血糖水平标准差(SDBG)、最大血糖波动幅度(LAGE)和SclichtkrullMz值(M值),从四个不同方面来评价血糖的稳定性。LAGE是日内血糖最高值与最低值之差,M值计算方法参照相关文献:M=|10LOG10(BG/5)|3/N,BG为血糖值,N为测量血糖次数。统计学分析:所有资料采用SPSS17.0统计软件进行分析。血糖稳定性的评估指标服从正态分布,以x珋s表示,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD法,以P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1大鼠一般状况NC和NF组大鼠无糖尿病症状,精神状态良好,毛皮有光泽,动作自如,反应灵敏。DM和DF组大鼠呈现明显多饮、多食、多尿典型的糖尿病症状,精神逐渐萎靡,毛皮污秽无光泽,体型消瘦、蜷卧拱背,早期多动,后期反应迟钝,部分大鼠开始出现晶状体混浊(图1)。2.2大鼠体质量变化所有大鼠体质量在实验前比较

参考文献

引证文献

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