Kin17基因在斑马鱼胚胎发育过程中的表达特性分析

作者:刘晓奕;张雁;喻佩;易桦林;魏峰 刊名:吉林农业大学学报 上传者:孙霞

【摘要】Kin17是一种在物种进化中较保守的、在各种组织中普遍表达的蛋白。为明确Kin17基因在斑马鱼发育中的表达特性及在斑马鱼胚胎发育过程中的功能,利用RT-PCR和Q-PCR方法检测Kin17 mRNA在斑马鱼中的表达情况,运用免疫组织化学技术检测Kin17蛋白在成鱼各组织中的表达特性。采用胚胎整体原位杂交(WISH)方法观察Kin17 mRNA在斑马鱼胚胎内的表达分布情况。利用吗啉反义寡核苷酸介导的基因敲降技术降低Kin17的表达水平,并观测斑马鱼胚胎发育情况。结果表明:Kin17转录本母源存在,Kin17 mRNA的表达水平在原肠期前表达较低,到体节期迅速上升且稳定在较高水平。Kin17基因在斑马鱼成鱼多个组织中均有表达,高表达于卵巢、精巢、肠道组织。原位杂交结果显示,Kin17基因在斑马鱼胚胎的原始生殖细胞、脑部、眼部中的表达量较高。注射Kin17吗啉反义寡核苷酸使Kin17基因表达受到抑制,导致斑马鱼胚胎发育迟缓,出现眼部缺失、腹腔肿大、尾部缺失等不同程度的畸形。上述结果提示,Kin17在斑马鱼胚胎发育过程中发挥重要作用。

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吉林农业大学学报 2015,37( 1) : 103~110 http: / /xuebao.jlau.edu.cn Journal of Jilin Agricultural University E-mail: jlndxb@ vip.sina.com Kin17 基因在斑马鱼胚胎发育过程中的表达特性分析* 刘晓奕1,张 雁2,喻 佩2,易桦林2,魏 峰1** 1. 吉林农业大学生命科学学院,长春 130118; 2. 中山大学生命科学学院,广州 510006 摘 要: Kin17 是一种在物种进化中较保守的、在各种组织中普遍表达的蛋白。为明确 Kin17 基因在斑马鱼发育中的表达特性及在斑马鱼胚胎发育过程中的功能,利用 RT-PCR 和 Q-PCR 方法检测 Kin17 mRNA 在斑马鱼中的表达情况,运用免疫组织化学技术检测 Kin17 蛋白在成鱼各组织中的表达特性。采用胚胎整体原位杂交( WISH) 方法观察 Kin17 mRNA 在斑马鱼胚胎内的表达分布情况。利用吗啉反义寡核苷酸介导的基因敲降技术降低 Kin17 的表达水平,并观测斑马鱼胚胎发育情况。结果表明: Kin17 转录本母源存在,Kin17 mR-NA 的表达水平在原肠期前表达较低,到体节期迅速上升且稳定在较高水平。Kin17 基因在斑马鱼成鱼多个组织中均有表达,高表达于卵巢、精巢、肠道组织。原位杂交结果显示,Kin17 基因在斑马鱼胚胎的原始生殖细胞、脑部、眼部中的表达量较高。注射 Kin17 吗啉反义寡核苷酸使 Kin17 基因表达受到抑制,导致斑马鱼胚胎发育迟缓,出现眼部缺失、腹腔肿大、尾部缺失等不同程度的畸形。上述结果提示,Kin17 在斑马鱼胚胎发育过程中发挥重要作用。 关键词: Kin17 基因; 斑马鱼; 胚胎发育; 表达特性中图分类号: S965. 8; Q786 文献标识码: A 文章编号: 1000-5684( 2015) 01-0103-08 DOI: 10.13327/j.jjlau.2014.2316 引文格式: 刘晓奕,张雁,喻佩,等.Kin17 基因在斑马鱼胚胎发育过程中的表达特性分析[J].吉林农业大学学报,2015,37( 1) :103-110. Expression Pattern Analysis of Kin17 Gene in Zebrafish Embryonic Development LIU Xiao-yi1,ZHANG Yan2,YU Pei2,YI Hua-lin2,WEI Feng1 1. College of Life Sciences,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China; 2. School of Life Sciences,Sun Yat-Sen University,Guangzhou 510006,China Abstract: Kin17 is a gene that is highly conserved across evolution expressed in human tissue. To explore the function of Kin17 protein in the whole process of zebrafish embryonic development as well as spatio-temporal protein expression pattern of Kin17 in the adult ze

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