SD大白鼠高脂血症及脂肪肝模型的建立

作者:王赫;杨良月;曹晓东;钱琳娜;吴树清;王新生 刊名:黑龙江畜牧兽医 上传者:郑泽光

【摘要】为了建立SD大白鼠高脂血症及脂肪肝模型,试验将SD大白鼠随机分为2组,分别给予正常饲料、高脂饲料,连续饲喂30 d,测定SD大白鼠血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和胆汁酸,取SD大白鼠肝脏称湿重,计算肝脏指数(肝脏湿重与SD大白鼠体重之比),并取一小块肝脏组织置于10%中性福尔马林溶液中固定,苏木精-伊红染色(H.E.染色),显微镜下进行组织病理学检查。结果表明:与对照组相比,高脂模型组血清TC、LDL-C含量极显著升高(P<0.01),高脂模型组血清HDL-C含量极显著降低(P<0.01);高脂模型组肝脏指数、第30天胆汁酸指标极显著高于对照组(P<0.01)。病理组织学检查结果表明,高脂模型组SD大白鼠肝小叶结构轮廓基本消失,肝细胞形态不规则,大部分肝细胞肿胀呈气球样变,并可见肝细胞空泡变性,部分肝细胞出现溶解性坏死。说明采用高脂饲料饲喂SD大白鼠30 d可出现高脂血症,并且导致肝脏肿大、脂肪肝及部分肝细胞出现溶解性坏死。

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近年来,随着人们生活水平的日益提高,高脂血症和脂肪肝的发病率逐年增加[1]。高脂血症是由多种原因导致的血浆中胆固醇和三酰甘油(TG)水平升高的一类疾病,引起动脉粥样硬化,进而引发诸多相关疾病,威胁人类健康[2]。当肝细胞内脂质蓄积超过肝湿重的5%或组织学上每单位面积有1/3以上的肝细胞脂变时称为脂肪肝[3]。随着人类饮食结构的改变,高脂血症与脂肪肝在我国的发病率逐年升高[4]。试验选用高脂饲料诱导SD大白鼠高脂血症及脂肪肝,为研究高脂血症对SD大白鼠的代谢调节试验提供试验动物模型。1材料1.1试验动物SD大白鼠,SPF级,20只(雌雄各半),体重为170~200g,由北京军事科学医学院提供。1.2试剂和仪器胆固醇试剂(生产批号为20120618)、胆酸钠试剂(生产批号为20120528),安徽天启化工科技有限公司生产;轮转式切片机(型号为YD-1508A),浙江金华益迪医疗设备厂生产;全自动生化仪(型号为7160),日本HitachiHigh-TechnologiesCorporation公司生产;显微镜(型号为CX21FS1),日本OLYMPUS公司生产;电子天平(型号为HZT-A200),福州华志科学仪器有限公司生产。1.3高脂饲料高脂饲料由猪油(4.0%)、胆固醇(2.5%)、胆酸钠(0.7%)、普通混合饲料粉(92.8%)组成。先人工充分混匀,再经搅拌压成圆条状颗粒,真空包装后经辐照、消毒,备用,由内蒙古金宇保灵生物药品有限公司加工制作。2方法将SD大白鼠随机分为对照组、高脂模型组,每组10只(雌雄各半)。对照组饲喂普通饲料,高脂模型组饲喂高脂饲料,平均每天每只饲喂约20g。动物造模30d,试验结束前1d晚上禁食,自由饮水,次日对SD大白鼠心脏采血,分离血清,-20保存,由北京华英生物技术研究所检测大白鼠血清TG、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和胆汁酸指标。取肝脏,称量湿重,计算肝脏指数,并在肝右叶离边缘1cm处横切一块肝脏组织,并用10%中性福尔马林溶液固定,常规脱水,苏木精-伊红染色(H.E.染色),制作肝脏病理切片并观察。肝脏指数(%)=肝脏湿重/体重100%。肝脏指数表示肝脏内部蓄积脂肪的程度,肝脏指数越大说明肝脏内部蓄积脂肪的程度越高。应用SPSS17.0统计学软件对试验数据进行处理。3结果与分析3.1SD大白鼠血脂的变化饲喂高脂模型组SD大白鼠高脂饲料30d后,与对照组相比,高脂模型组血清TC、LDL-C含量极显著升高(P<0.01),高脂模型组血清HDL-C含量极显著降低(P<0.01),结果见表1。3.2SD大白鼠体重及肝脏指数的变化将摘取的肝脏用滤纸吸去表面组织液,在电子天平(型号为HZT-A200)上称其湿重,观察肝脏表面有无病理变化,计算肝脏与体重的比值[5]。表1SD大白鼠血脂水平测定结果mmolL-1组别nTGTCHDL-CLDL-C对照组100.7960.0952.0240.3581.4980.2900.9630.080高脂模型组100.7120.1362.933**0.4780.958**0.1501.512**0.268注:同列数据肩标**表示差异极显著(P<0.01)。于试验结束后,高脂模型组SD大白鼠体重略低于对照组,肝脏湿重略高于对照组,高脂模型组SD大白鼠肝脏指数极显著高于对照组(P<0.01),结果见表2。表2SD大白鼠体重、肝脏湿重及肝脏指数的变化组别n第1天体重/g第30天体重/g第30天肝脏湿重/g肝脏指数/%对照组10175.316.3316.63

参考文献

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