卡他莫拉菌UspA1蛋白多克隆抗体的制备及鉴定

资源类型: 资源大小: 文档分类:生物科学 上传者:梁京涛

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【作者】 王辉   杨波   赵可胜   李家吉   李新   孔萌萌   宫春杰   王毅   陶冶   张秋   胡征  

【关键词】卡他莫拉菌 UspA1蛋白 原核表达 多克隆抗体 

【出版日期】2018-01-01

【摘要】为制备抗卡他莫拉菌(Moraxella catarrhalis,Mc)表面蛋白UspA1胞外结构域的多克隆抗体(PcAb),对UspA1蛋白进行生物信息学分析,获取胞外结构域中抗原表位最为丰富的肽段,找到其对应的基因序列并引入大肠杆菌偏好性密码子,对其优化后化学合成全基因序列。将该基因序列按常规方法克隆入表达载体p ET-28a(+)后表达重组UspA1-His融合蛋白并纯化。以该纯化抗原免疫新西兰大白兔,经4次免疫后,用Protein A亲和层析柱从抗血清中纯化出抗UspA1-His融合蛋白PcAbIgG。经免疫荧光法、酶联免疫吸附法及Western blotting鉴定,抗UspA1-His融合蛋白PcAb能特异性识别UspA1蛋白的表面暴露区。该多抗的制备为下一步建立卡他莫拉菌快速检测技术奠定了基础。

【刊名】生物工程学报

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