梅山猪LH-β基因真核表达系统的构建及体内外转染表达效果的研究

资源类型: 资源大小: 文档分类:农业科学

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【作者】 吕学斌  李江凌  高荣  武梅  杨毅  王丽焕  刘世贵 

【关键词】   LH-β基因  真核表达  转染  生殖  小鼠 

【出版日期】2005-09-25

【摘要】将克隆的梅山猪LH-β基因亚克隆到真核表达型载体VR1020上,通过质粒PCR的方法在转化子中筛选阳性克隆,用BamHⅠ、BglⅡ双酶切鉴定重组子。得到的重组真核表达质粒转染Cos7细胞株,RT-PCR检测猪LH-β表达情况。然后用VPLH-β质粒、VR1020分别肌肉注射小鼠,研究了小鼠的生殖特性情况。结果显示:通过质粒PCR和双酶切分析,得到猪LH-β基因以正确方向插入的重组真核表达质粒VPLH-β。重组质粒VPLH-β经脂质体介导转染Cos7细胞,培养不同时间后提取mRNA进行RT-PCR,发现转染细胞RNA中含有与LH-β基因对应的mRNA;结果表明已成功构建了PLH-β的真核表达质粒,能正确转录表达LH-β。动物试验结果显示PLH-β免疫小鼠后的各项指标均高于对照处理。克隆构建的猪VPLH-β质粒能发挥明显的生殖生理调节作用,可较好地促进雌性动物的排卵、怀孕和正常产仔。

【刊名】畜牧兽医学报

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