PCNA、E2F-1、RASSF1A蛋白表达与胃癌生物学关系研究

作者:刘志勇;易坚;邹小明 刊名:黑龙江医药 上传者:惠博

【摘要】目的:本研究旨在探讨PCNA、E2F-1、RASSF1A在胃癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:采用免疫组化技术(SP法)检测60例胃癌组织及正常胃黏膜中PCNA、E2F-1、RASSF1A蛋白的表达情况。结果:胃癌组织中PCNA蛋白的阳性表达率为80.0%,正常胃黏膜组织中为20.0%,两组比较具有统计学意义(P<0.01);PCNA蛋白的表达与分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度有关(P<0.05)。胃癌组织中E2F-1阳性表达率为73.3%,正常胃黏膜中为8.3%,两者比较有显著性差异(P<0.01);E2F-1在癌组织中的表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移及肿瘤浸润深度无相关性(P>0.05)。R ASSF1A在胃癌中的阳性表达率为40.0%,在癌旁正常黏膜中为100.0%,两者比较差异显著(P<0.01);R ASSF1A在癌组织中的表达与胃癌分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及TNM分期具有相关性(P<0.05)。结论:PCNA、E2F-1、RASSF1A在胃癌细胞中异常表达,共同参与了胃癌的发生发展。

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胃癌是一种常见的恶性肿瘤,在我国常见的恶性肿瘤中,胃癌发病率居第二位,死亡率则位居第一,严重危害人类健康[1]。最新的研究表明,胃癌的发生是一个多因素参与的复杂癌变过程,不仅与癌基因的激活和抑癌基因的失活有关,还与细胞凋亡被抑制有关。本研究应用免疫组化技术检测PCNA、E2F-1、RASSF1A在胃癌中的表达,以探讨它们在胃癌进展过程中的意义及其与临床病理生物学行为的关系。1.材料与方法1.1材料赣南医学院第一附属医院2010年1月到2011年2月手术切除的胃癌标本60例。患者年龄为28岁~78岁,男34例,女26例。分别取瘤体60例及距瘤体5cm处正常胃组织60例。1.2试剂:鼠抗人RASSF1A单克隆抗体购自美国SantaCruz公司,E2F-1鼠抗人单克隆抗体购自美国NeoMarkers公司;PCNA单克隆抗体购自福建迈新生物技术公司;广谱型S-P试剂盒、DAB染色剂购自福建迈新生物技术公司。1.3方法:所有腊块标本行4m厚连续切片。S-P法免疫组化染色按试剂盒说明操作,PBS代替一抗作阴性对照。用已知阳性片作阳性对照。1.4结果判断:细胞呈清晰的棕黄色为阳性,按阳性细胞所占比例分为:+:阳性细胞数<25%;++:阳性细胞数25%~50%;+++:阳性细胞数>50%;-:细胞无棕黄色或与背景一致的浅棕色为阴性。判定采用双盲对照法。1.5统计学处理:计数资料四格表卡方检验,P<0.05表示差异有显著意义。2.结果2.1PCNA、E2F-1、RASSF1A蛋白在胃癌和正常黏膜中的表达:PCNA、E2F-1、RASSF1A蛋白在胃癌组织中的阳性表达率分别为80.0%(48/60)、73.3%(44/60)和40.0%(24/60),在正常黏膜组织中阳性表达率分别为20.0%(12/60)、8.3%(5/60)和100.0%(60/60),经统计学分析,3种基因蛋白表达与正常胃组织间均有显著性差异(P<0.01)(表1)。表1PCNA、E2F-1、RASSF1A蛋白在胃癌和正常黏膜中的表达组织类型nPCNAE2F-1RASSF1A阳性阳性率阳性阳性率阳性阳性率胃癌组织604880.04473.32440.0正常组织604820.0*48.3*60100.0*两组比较:P<0.012.2胃癌组织中PCNA、E2F-1、RASSF1A蛋白表达与临床病理指标的关系:PCNA蛋白的表达与胃癌组织学分级、淋巴结转移、肿瘤浸润深度有关(P<0.05),低未分化胃癌中PCNA蛋白阳性率为97.1%,高于高中分化胃癌(56.7%);在淋巴结转移组阳性率(94.6%)高于淋巴结未转移组(56.5%);侵及浆膜层者PCNA蛋白阳性表达率(91.7%)明显高于未侵及浆膜层者(62.5%)。胃癌组织中E2F-1蛋白的表达与临床病理分期、组织学分级、淋巴结转移及肿瘤浸润深度无相关性(P>0.05)。RASSF1A蛋白的表达与临床病理分期、组织学分级、淋巴结转移及肿瘤浸润深度有关(P<0.05)(表2)。表2胃癌中PCNA、E2F-1、RASSF1A蛋白表达与临床病理指标的关系病理参数nPCNAE2F-1RASSF1A阳性阳性率阳性阳性率阳性阳性率浸润深度T1+T2241562.51770.81562.5T3+T4363391.7*2775.0925.0*分化程度高中分化261556.71765.41869.2低未分化343397.1*2779.4617.6*淋巴结转移有373594.62978.42054.1无231356.5*1565.2417.4*TNM分期+26186

参考文献

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