铁皮石斛与钩状石斛杂交及种子无菌播种快繁研究

作者:付传明;冼康华;黄宁珍;赵志国;唐凤鸾;石云平;何金祥 刊名:种子 上传者:郑雷

【摘要】以铁皮石斛和钩状石斛为研究对象,通过人工辅助杂交获得杂交种子,诱导种子离体萌发,开展无菌播种技术研究。结果表明,铁皮石斛与钩状石斛杂交容易成功,杂交坐果率可达到80%;适宜的种子萌发培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,培养30 d时的萌发率为89.7%;培养基MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+香蕉100 g/L+AC 1.0 mg/L对原球茎的增殖最好;培养基MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1mg/L+马铃薯200 g/L+AC 1.0 g/L对原球茎的分化最好;壮苗生根培养基配方为1/2 MS+NAA0.6 mg/L+香蕉100 g/L+AC 1.0 g/L,植株生长健壮,生根率100%,移栽成活率达95%以上。

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铁皮石斛(DemdrobiumofficinaleKimuraetMigo)与钩状石斛(DendrobiumaduncumWallexLindl.)均为兰科石斛属多年生草本植物,分布于我国南方各省市,生于海拔700~1600m的山地林中树干和半阴湿的岩石上,喜温暖湿润气候和半阴半阳的环境,不耐寒,一般仅能耐-5的低温。铁皮石斛是我国传统珍稀名贵中药材,具有益胃生津、滋阴清热等功效,并以其味甘、质重、柔韧和黏性大而被视为药材珍品,自身繁殖力低,对环境条件要求高,人工栽培难度大[1]。钩状石斛在广西和云南等地也作为石斛入药使用,在抗衰老、增强人体免疫力等方面具有一定的作用。钩状石斛相较铁皮石斛容易栽培,产量高,植株去掉叶片后与铁皮石斛鲜条十分相似,常扭成螺旋状成品“枫斗”作为铁皮石斛替代品销售。石斛属植物自然条件下结果甚少,果实为蒴果,内含数万粒细小粉末状的种子,种子的种皮内只含未成熟的胚,不含胚乳,需与某些真菌共生才能萌发[2,3],自然繁殖十分困难。通过人工提供营养辅助种子非共生萌发,是对其进行快速繁殖育苗的有效手段,是保护和利用石斛资源的重要途径。近年来,关于兰科石斛属植物种质创新已有一些报道[4,5],但铁皮石斛与钩状石斛杂交及无菌播种的研究未见报道。本研究选择铁皮石斛与钩状石斛进行种间杂交,以了解种间杂交的结实情况,并开展杂交子代的无菌播种试验,拟摸索出一套成熟的有性杂交繁育技术,培育出产量和药用价值高的新品种,为今后开展药用石斛杂交育种及工厂化育苗提供参考资料。1材料与方法1.1试验材料铁皮石斛野生植株采自广西恭城、灵川,钩状石斛野生植株采自广西百色,引种到广西桂林广西植物研究所内的兰科植物资源圃内,待开花后选取优良株系进行试验。1.2试验方法1.2.1杂交授粉选择铁皮石斛优良株系作为母本,钩状石斛优良株系作为父本进行杂交,取钩状石斛开花第2天的新鲜花粉,授予开花3d内的铁皮石斛花朵的柱头窝内,授粉后第10天统计坐果率。1.2.2培养基的配制及培养条件以MS或1/2MS为基本培养基,植物生长调节剂表2不同培养基上原球茎增殖及分化情况编号培养基组成原球茎增殖、分化情况1MS增殖少;分化少2MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+香蕉汁100g/L+AC1.0g/L增殖速度中等;分化少3MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+香蕉汁100g/L+AC1.0g/L增殖速度中等;分化少4MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L+香蕉汁100g/L+AC1.0g/L增殖速度快;分化少5MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L+香蕉汁100g/L+AC1.0g/L增殖速度快;分化少,后期少部分呈玻璃化现象6MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L+马铃薯汁200g/L+AC1.0g/L增殖速度中等;分化多7MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L+马铃薯汁200g/L+AC1.0g/L增殖速度中等;分化多,后期少部分呈玻璃化现象选用6-BA和NAA,外源添加物为马铃薯汁(马铃薯洗净去皮切成小块,加水煮烂,用4层纱布过滤)和香蕉汁(香蕉去皮后用榨汁机绞碎),并附加20~30g/L蔗糖、1.0g/L的活性炭(AC)及5.0g/L的琼脂粉,pH值为5.8。培养基配置分装后于121、压力为105Pa的条件下灭菌25min。冷却后接入植物材料,在温度(253)、光照强度2000~3000lx、光照时间12h/d的条件下培养。1.2.3种子的灭菌消毒及诱导萌发采摘人工授粉后生长120d左右的尚未开裂

参考文献

引证文献

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