真菌在罗河石斛和铁皮石斛种子萌发中的作用

作者:郭顺星;徐锦堂 刊名:中国医学科学院学报 上传者:范玲娜

【摘要】本实验证明,从兰科植物原球茎中分离的3种真菌对促进石斛种子萌发有显著效果,采用种子伴菌播种方法,罗河石斛种子发芽率达20%,铁皮石斛种子发芽率达64%,而无菌播种则无1粒种子萌发。对铁皮石斛种子接菌萌发中细胞超微结构的变化进行观察,菌丝由胚柄侵入种胚,染菌的胚细胞器消失;菌丝被胚细胞质包围并加厚,菌丝逐渐被分解作为胚萌发的营养物质,邻近染菌细胞的未染菌胚细胞代谢功能旺盛。

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石解属兰科(orchidaceae)植物,为名贵中药材,以茎入药,《神农本草经》列为上品.罗河石解(Dendrobiumlohohens)和铁皮石解(Dendrobiumeandidum)均为石料类药材,具有滋阴养胃,清热生津之功能,经济价值很高。石解自然繁殖力低,且由于药用及出口需要,使野生石解过度采挖,故其资源已日渐枯竭.为加快石解快速繁殖,现多采用种子播种法.近年来国内开展了石解种子无菌培养0~”,并获得幼苗,但由于幼苗移植后生长缓慢,故未能推广生产.为探索一条石解种子有菌萌发的新途径,本研究采用石解种子伴菌萌发法,并取得初步成功。材料与方法一、供试宾,1957年野生细叶石解(D.haneoekii)及见血清(Liparisnervosa)种子萌发的原球茎中分离的G3、G4号菌株,经鉴定G3号菌株为微囊菌属(MicroascuoZu-kal),G4号菌株为毛壳菌属(ChaetomiumKunzeetsehmidt);195一年由天麻(Gastro-diaelata)原球茎中分离的紫其小菇(Myeenaooundieola)“),上述真菌均由本所真菌室提供。二、植.种于为四川省峨眉山野生罗河石解及铁皮石解未开裂果实中的成熟种子.三、宾,培葬及.种方法将无菌树叶置于平面PDA培养基上,分别接种3种真菌,25’C恒温培养至菌丝布满树叶即为菌叶.将菌叶取出置培养皿湿润的海绵上并播种种子,以无菌树叶播种为对照,重复3次;播种后将培养皿置30W日光灯下,距离25cm,日照8h,25.C恒温培养.皿内不断补充灭菌后的自来水保湿,每7d观测l次种胚的生长量、发芽率及生长动态.四、妞薄切片砚案分别取铁皮石解种子及种子接紫其小菇菌萌发中的材料,制片参考文献5方法.切片在H一00型电子显微镜下观察并照像.真菌在罗河石解和铁皮石解种子萌发中的作用结果与讨论罗河石解、铁皮石解种子同其它兰科植物种子一样,构造简单,种皮由单层细胞组成,胚位于种皮内中间部位,种子成熟时为原胚阶段,不具萌发所需的营养贮存组织.罗河石解科子为树榄形,长385.50卜m,宽116.55协m;种胚呈卵形,长204.24协m,宽113.22林m(图一a)。铁皮石解种子长426.24卜m,宽l一3.22卜m;胚长175.71卜m,宽109.89协m(图19)。一、宾,对罗河石解种子晌发生长的作用在菌叶上播种种子后,5~7d陆续有菌丝侵入胚细胞:播种后7~14d,胚生长较快(以胚长计算);14~2ld,胚生长减慢或处于停滞状态,这是因为种子即将萌发,受种皮束缚所致;Zld后胚突破种皮(原球茎阶段).生长速度显著加快(图2).在无菌树叶(对照)上播种的种子,由于胚吸水膨胀,所以培养前期胚长度稍有增加,但无种子萌发.14d后有些种子收缩变黄而死亡,胚测量值呈下降趋势.种子伴3种真菌分别播种,发芽率达20肠左右;统计结果证明(LSRo.os).3种真菌对罗河石解种子发芽率的影响有显著差异:而用无菌树叶播种,无1粒种子发芽(图3).覃菌伴播罗河石解种子,种子发芽形成的原球茎生长健壮(图Ic,d),初期色白微黄,后期变绿,有的原球茎呈节状生长(图lb);播种40d后,发芽形成的原球茎开始有假根等营养器官分化(图le,f)。二、宾,对铁皮石解种子峭发生长的作用G3、G4号菌伴播铁皮石解种子,种子发芽率达64肠(图a),紫其小菇的作用次之;在无菌树叶上播种,无种子萌发。真菌伴播种子sd后胚体相继变绿;30d时种子开始发芽(图lh,i);45d时即将突破种皮的胚或种子萌发形成原球茎,有些分化出假根(图lj)。。.日二

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