CAC1对胃癌细胞系AGS细胞周期的调控作用(无全文)

作者:郑琪;张茜;张彧;廖子君;姚煜;南克俊 刊名:山西医科大学学报 上传者:

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【摘要】目的研究新基因CAC1对胃癌细胞系AGS的细胞周期和细胞周期相关基因表达的调控作用。方法将AGS细胞分为空白对照组、阴性对照组和干扰组,分别给予细胞培养液、阴性对照siRNA和有效的CAC1-siRNA处理,用流式细胞仪检测细胞周期的变化,实时定量PCR和Western blot法检测细胞周期相关基因(p53、cyclin A、cyclin E及CDK2)在mRNA和蛋白水平的表达变化。结果 CAC1沉默后,流式细胞仪检测发现,RNA干扰组的AGS细胞G1期细胞比例[(73.23±3.04)%]较对照组[(45.33±0.82)%]明显增加(P<0.05),S期细胞比例[(5.40±5.83)%]较对照组[(41.07±1.07)%]显著减少(P<0.05)。CAC1沉默后,与对照组相比,干扰组无论是cyclin E的mRNA表达水平(1.000±0.000 vs 0.294±0.011,P<0.05),还是cyclin A的mRNA表达水平(1.000±0.000 vs 0.886±0.039,P<0.05),均出现了明显的下降,p53 mRNA表达水平显著上升(1.000±0.000 vs 2.233±0.122,P<0.05),CDK2mRNA表达水平无明显变化(1.000±0.000 vs 0.952±0.007,P>0.05)。类似地,CAC1沉默后,与对照组相比,干扰组的cyclin E蛋白表达水平(0.667±0.236 vs 0.165±0.046,P<0.05)和cyclin A蛋白表达水平(0.607±0.284 vs 0.208±0.029,P<0.05)均出现了明显的下降,P53蛋白表达水平出现了显著的上升(0.326±0.054 vs 0.656±0.106,P<0.05);而CDK2蛋白表达水平无明显变化(0.864±0.175 vs 0.717±0.100,P>0.05)。结论 CAC1可促进胃癌AGS细胞的G1/S期转换,下调p53的表达,上调cyclin E和cyclin A的表达。

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山西 医科 大学学报 ,年 月 ,第 卷 第 期 对 胃癌 细胞 系 细 胞 周 期 的调 控 作 用 郑 琪,张 茜,张 或,廖 子君,姚 煜,南克俊 (西安交通大学医学院附属陕西省肿瘤医院内一科 ,西安 ;西安交通大学第一附属 医院肿瘤 内科 ) 摘要 : 目的 研究新基 因 对 胃癌 细胞系 的细胞周期 和细胞周期 相关基 因表达 的调 控作用。 方 法 将 细 胞分 为空白对 照组 、阴性对照组 和干扰 组 ,分别给予细胞 培养液 、阴性对 照 和有效 的 一处 理 ,用 流式 细胞仪 检测 细胞周期的变化 ,实 时定 量 和 法检测细胞周期相关基 因(、、及 )在 和蛋 白水平 的表 达 变化 。 结 果 沉 默 后 ,流 式 细胞 仪 检 测发 现 ,干 扰 组 的 细 胞 期细 胞 比例 ( ) 较对照组 () 明显增加 (),期细胞 比例 ()较对 照组 () 显著减少 ()。沉 默后 ,与 对照组 相 比 ,干 扰组无 论是 的 表达水 平 ( ,),还是 的 表达水平 ( ,),均出现了 明显的下降 , 表 达水 平显著上升 (,),表 达水平无 明显变化 ( ,)。类 似地 ,沉默后 ,与对照组相 比 ,干扰组 的 蛋 白表达 水平 ( , )和 蛋 白表达水平 (,)均 出现了明显 的下降 ,蛋 白表达水平 出现 了 显著 的上升 ( ,);而 蛋 白表达水平无 明显 变化 (, )。 结论 可促 进 胃癌 细胞 的 期转换 ,下 调 的表达 ,上调 和 的表达。 关键词 : 胃癌 ; 细 胞 ; ; 细胞周期 中图分类号 : 文献标 志码 : 文章编号 : ()一 : ,,,,,(, , ,’, ’,; , ,’) : , ,,一 , ,(,,) ,() (),),() ( ) , ,(,) ( ,), ( ,), (,),(, )( , ) ,(,), (, ) , : ; ; ; 世 界 范 围 内每 年 大 约 有 万 人 新 诊 断 为 胃癌 ,万 人 死 于 胃癌 ,胃癌 的年 发 病 人 数 在 所 有 恶性 肿 瘤 排 第 四位 ,年 死 亡人 数 排 第 二 位 ,超 过 的 胃 癌 发 病 和 死 亡 患 者 都 属 于 发 展 中 国 家。晚 期 转 移 性 的 胃癌 患 者 预 后 不 良 ,中位 生 存 期 仅 仅 个 月 ,年 生 存 率 不 足 。 胃癌 具 有 相 当高 的 发 病 率 和 死 亡 率 ,有 必 要 深 入 地研究 其 病 因和 发 病 机 制 ,以 提 高诊 断 和 治疗 水 平 。 ()是 年 在结 直肠 癌 中鉴定 发 现 的一 个 新 基 因 ,研 究 发 现 , 可促 进大 肠癌 细胞 增殖 ,推动 细胞 周 期从 。期 向 期转 换 ,它 能够 特 异性 地 和 结 合 并 提 高 其 活 性 。而且 ,在 阿 尔 茨 海 默 病 患 者 的 脑 组 织 呈 现低 表 达 ,并 抑 制 氧 化 应 激 损 伤 所 致 的 细 胞 凋 亡 。进 一 步的研究 还 发 现 ,大 肠 癌 中去 氧 胆 酸 通 过 下 调 一一来 增 加 的 表 达 ,进 而 促 组 和 组 ,将 两 种 干 扰 序 列 与 不 含 血清 的细胞 培养 液 混匀 ,设置平 行孔 和对 照组 ,对 照 组为 胃癌 细 胞 ()组 和单 加脂 质

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