转染的miR-1908通过靶向转化生长因子β1抑制肾脏纤维化

作者:谢飞;李小顺;韦婵;苟亮;党彦龙;陕泽嫘 刊名:细胞与分子免疫学杂志 上传者:张升昌

【摘要】目的探讨miR-1908在肾纤维化中的调控作用。方法运用实时定量PCR检测纤维化进程中人肾组织中miR-1908和转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA的水平;运用生物学信息分析和萤光素酶报告基因技术探索miR-1908对TGF-β1的靶向调控关系;体外转染miR-1908腺病毒表达载体后,运用Western blot法检测人原代肾间质细胞中TGF-β1、smad2/3和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的蛋白水平;对早期肾纤维化模型小鼠腹腔注射miR-1908腺病毒表达载体6周后,Masson染色观察肾纤维化情况。结果 miR-1908在人肾纤维化过程中水平逐渐降低,与TGF-β1 mRNA水平变化趋势相反;过表达miR-1908后,原代肾间质成纤维细胞中TGF-β1、smad2/3和MMP-2的蛋白水平均显著下调;注射miR-1908腺病毒表达载体6周后,与未注射组相比,小鼠肾纤维化症状明显缓解。结论 miR-1908通过靶向TGF-β1,对抑制肾脏纤维化有一定作用。

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l682 · 论著 · 分了免疫学杂志—(Chin J—Cell Mol Into LJII(Jl 三 3 (I 2) 文章编号 :1007—8738(2015)12—1682—04 转染的 miR.1908通过靶 向转化生长因子 阻 抑制 肾脏纤维化 谢飞 ,李小顺,韦婵 ,苟亮,党彦龙 ,陕泽嫘 (武警陕西省总队医院肾脏科,陕西 西安710054) [摘 要] 目的 探讨 miR一1908在肾纤维化中的调控作用。方法 运用实时定量 PCR检测纤维化进程中人肾组织中nfiR一1908 和转化生长因子 pl(TGF.B1)mRNA的水平 ;运用生物学信息分析和萤光素酶报告基因技术探索 miR一1908对 TGF—p1的靶 J川 控关系;体外转染 miR.1908腺病毒表达载体后,运用 Western blot法检测人原代肾问质细胞中 TGF—pl、smad2/3和基质金 白酶 2(MMP-2)的蛋 白水平 ;对早期肾纤维化模型小鼠腹腔注射 miR一1908腺病毒表达载体 6周后,Masson染色观察肾纤维化 情况。结果 miR一1908在人肾纤维化过程中水平逐渐降低,与 TGF—pl mRNA水平变化趋势相反;过表达miR一1908后, 代。 问质成纤维细胞中TGF pl、smad2/3和 MMP一2的蛋白水平均显著下调 ;注射 miR一1908腺病毒表达载体 6周后,与未沣射 l十lI 比,小鼠肾纤维化症状明显缓解。结论 miR.1908通过靶向TGF—pl,对抑制肾脏纤维化有一定作用。 [关键词] 肾纤维化 ;miR一1908;转化生长因子 131;腺病毒表达载体 [中图分类号] 11392—33,Q752,R692 [文献标志码]A Transfected rriR-lglB inhibits renal fibrosis rqa targeting仃al m血 growth factor beta 1 XIE Fei ,LI Xiaoshun,W EI Chan,GOU Liang,DANG Yanlong,SHAN Zelei Department of Nephrology,Shaanxi General Hospital of CAPF,Xi’all 710054,China Corresponding author,E—mail:xiefeixf@ sohu.con l Abstract l ohiective To explore the regulatory role of miR-1908 jn renal fibrosis.Methods The IeveI of miR—l 908 and transforming growth factor beta 1 (TGF-p1)mRNA during renal fibrosis were detected with real—time quantitative PCR. Bioinformatics and luciferase reporter gene analyses were applied to determine the targeting relationship between miR一1 908 and TGF-131 mRNA.After primary human renal interstitiaI fibroblasts were transfected with miR一1908 adenoviraI expression vector/n vi

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