数码显微摄影技术在生药学教学与科研中的应用

作者:朱海涛;陈黎;邓雪华;杜士明;陆晓苏;雷震 刊名:医药导报 上传者:童群英

【摘要】目的介绍一种适用于生药教学的显微观察和记录方法。方法举例介绍数码显微摄影技术在生药学教学及科研中的应用。结果数码成像图比墨线图更真实、更直观地反映了药材的显微构造。结论该技术可应用于生药学教学及科研实践。

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数码显微摄影技术是数码照相技术与显微摄影技术的有机结合,是近几年逐步发展起来的一种观察和记录显微材料(生物的、物理的、化学的)的一项技术,可广泛应用于生物医学领域的各个学科当中,它在真实记录、研究各种生物组织微细结构等方面起着至关重要的作用[1~3]。利用显微摄影技术进行的中药显微鉴定虽已有应用,例如帅绯[4]对刺人参根的横切面、纵切面显微观察,但采用数码显微摄影技术进行显微鉴定的文献报道却很少。采用数码相机拍摄得到的显微图片可以真实地反映观察对象的各种显微特征。该技术快捷方便,容易操作,现对这项技术在生药学中的具体应用作一介绍。1仪器YS2-H型光学显微镜(日本Nikon),与显微镜配套使用的专用光学接口,目镜测微尺;E995型数码相机(日本Nikon);计算机(CPUP以上,操作系统windows98/windows2000或更高),图像编辑软件。2工作原理通过专用光学接口使数码相机与三目显微镜连接,使用显微镜搜寻目标材料,在数码相机屏幕上可直接观察到显微镜物镜下样本的显微特征,并可借助于照相机将在显微镜中看到的植物组织细胞拍成照片,照片以图像文件存入相机的存储卡,每个图像文件被自动按顺序命名。在计算机上使用看图软件,浏览存储卡上的照片,将自动命名的图像文件名按样品编号重新命名后保存到指定文件夹。用图像编辑软件对图像进行裁切、拼接等处理。3应用3.1准备为了能在计算机显示器上浏览、修改数码相机拍摄的照片,需安装数码相机驱动程序及图像编辑软件等相关软件。设置相机拍摄所需模式。3.2拍摄将制备好的切片置于显微镜下观察、鉴定、描述,选择具有代表性的切片,在低倍镜下观察,发现组织细胞后,打开显微镜上的光通路转换开关,将图像导入数码相机。此时无法通过显微镜的目镜观察,只能通过数码相机的LCD显示器观察组织细胞在镜头中的情况。按下数码相机变焦按钮,通过光学变焦,使图像在显示器上显示适当大小,拍成照片。若需观察组织细胞的详细情况,在低倍镜下发现目标后,转换成高倍镜观察,再用数码相机拍下照片,注意记录下观察对象的大小(如长度、直径)及一些描述细微特征(如淀粉粒、石细胞是否有层纹等),观察对象的大小用经过校准的目镜测微尺测量。3.3保存通过专用连接线将数码相机与计算机USB接口连接,将相机中的照片导入计算机,重新命名后,把照片按样品名称和编号保存到指定文件夹并将图片的相关信息记录在摘要中(方法是在需要记录的图片上按鼠标右键,选择“属性摘要”,将信息输入)。为便于查询,可按样品编号、类别等建立目录,输入相关信息于文档中,并使目录中的样品编号与其对应的照片及鉴定描述链接,从而提高查询速度。如将上述文件刻录至光盘,可长期保存,不易丢失。3.4图像裁剪拼接用图像编辑软件对图像进行裁剪、拼接等处理(对图像进行修饰时,要遵循真实的原则,不得对细胞及组织的色调、形状进行修改),以便形成完整的组织结构图或粉末图,反映药材切面上各部分组织之间的比例、分布样式以及药材组织中细胞的排列方式、局部特征或粉末特征。3.5查询查询时,打开图片文件夹,单击文件目录表上的样品编号,便可出现该编号的鉴定信息和相关照片,十分方便、快捷。必要时,可将数码照片冲洗出来。采用数码显微摄影技术,记录植物组织的显微特征,确保了鉴定结果的可靠性。4讨论4.1视场亮度显微摄影中,视场亮度要适中。亮度过大,标本细微层次损失(如淀粉粒的层纹);亮度过低则反差减弱,分辨率下降。因此,在显微照相中,调节光源亮度到适中,能提高照片的反差和清晰度及细微结构层次表现等。4.2比例尺的确定计算照片的放大倍数时,要用照相目镜的

参考文献

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