毛细管电泳分离检测茶叶中5种多酚类化合物

作者:马晓年;邵娅婷;李菲;熊杰;曹秋娥 刊名:食品科学 上传者:郑丹洁

【摘要】利用高效毛细管区带电泳,建立一种同时分离测定茶叶中儿茶素、表儿茶素、槲皮素、山奈酚和杨梅素的方法。在含有10 mmol/L Na2B4O7、5 mmol/Lβ-环糊精及8%(V/V)乙腈的运行缓冲溶液(pH 9.11)中,采用20 kV的分离电压、25℃的毛细管柱温和200 nm的检测波长,儿茶素、表儿茶素、槲皮素、山奈酚和杨梅素可以在14 min实现有效分离与检测,将方法用于不同茶叶样品中这5个组分的测定,相对标准偏差在4.0%以内,回收率为95.4%~104.6%。本方法简单、快速、线性范围较宽、重复性好,可用于茶叶中这5个组分的测定。

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茶在中国已有3000余年的食用历史,是目前世界上最为流行的饮料之一。茶叶中不仅含有丰富的维生素和矿物质,而且含有许多对人体有保健作用的功效成分,如茶蛋白、茶多酚、茶多糖、咖啡碱、茶叶皂苷、氨基酸、茶色素等,其中对人体健康最有益的物质之一是茶多酚。茶多酚是茶叶中酚类物质及其衍生物的总称,主要包括儿茶素类、黄酮、黄酮醇类、花青素类、花白素类和酚酸及缩酚酸类,具有强抗氧化性和降糖、减肥、抗动脉粥样硬化、抗衰老、抗辐射等作用[1-4],目前其肿瘤化学预防作用及抗HIV作用也引起了人们的广泛关注[2-6]。茶叶中多酚类物质的测定已有不少研究[7-10],采用的方法包括原子吸收光谱法[11]、紫外-可见分光光度法[12]、近红外光谱法[13-14]、色谱法[15]与毛细管电泳法[16]等,但现有这些方法都没有涉及茶叶中儿茶素、表儿茶素、槲皮素、山奈酚和杨梅素的同时分离分析。肖俊松[17]、孙晓莉[18]、邸羿[19]、付静[20]、Peres[21]和Bonoli[22]等分别采用高效液相色谱、超高效液相色谱和毛细管电泳测定了茶叶中的儿茶素类成分,但都没有涉及山奈酚、杨梅素和槲皮素的分析;李家华等[23]建立了测定茶中杨梅素、槲皮素和山奈酚的高效液相色谱法,但没有研究儿茶素和表儿茶素的检测;Lpez等[24]用毛细管胶束电动色谱测定了茶叶中7种儿茶素类化合物和槲皮素、百里香酚,但没有测定山奈酚和杨梅素;衷明华等[25]建立了茶叶中4种有效成分的毛细管区带电泳法,但只涉及了本研究中的5种成分中的表儿茶素。因此,本研究采用毛细管区带电泳模式,在优化电解质溶液与仪器工作条件的基础上,建立了一种同时分离测定儿茶素、表儿茶素、槲皮素、山奈酚和杨梅素的新方法,该方法简单快速、重复性好、线性范围宽,可用于茶叶中这5种组分的同时测定。1材料与方法1材料与方法1.1材料与试剂标准对照品儿茶素、表儿茶素、槲皮素、山奈酚、杨梅素中国食品药品检定研究院;-环糊精美国SigmaAldrich公司;Na2B4O7、乙腈、甲醇(均为分析纯)上海化学试剂有限公司;水为艾柯纯水器UP级水。1.2仪器与设备P/ACETMMDQ型高效毛细管电泳仪(配有二级管阵列紫外检测器)美国BeckmanCoulter公司;未涂层石英毛细管(57cm50cm,75m)河北省永年锐沣色谱器件有限公司;pHS-2C型pH计上海雷磁仪器厂。1.3方法1.3.1溶液配制标准溶液:儿茶素、表儿茶素、槲皮素、山奈酚、杨梅素储备液(1.0mg/mL)均用甲醇配制,4保存。样品溶液:参照文献[23],称取一定量经干燥粉碎后的茶叶样品或添加了一定量目标物标准品的茶叶样品,加入40mL甲醇和4mL盐酸,85水浴回流1.5h,过滤并用少量甲醇多次洗涤残渣,合并滤液与洗涤液,减压蒸馏至近干,残渣用甲醇溶解并定容到50mL。所有溶液在使用前均用0.45m滤膜过滤。1.3.2毛细管电泳条件运行电解质溶液:含有10mmol/LNa2B4O7、5mmol/L-环糊精、8%(V/V)乙腈的缓冲溶液(pH9.11);电泳仪器条件:分离电压20kV;毛细管柱温25;二级管阵列紫外检测器(经3D全波长扫描,最终选择检测波长为200nm);采用压力(0.5psi,3447.38Pa)进样5.0s。为确保重复性,毛细管柱每天在运行前及2次运行之间均依次用0.1mol/LNaOH、去离子水和运行缓冲溶液分别冲洗3、2、4min。数据处理采用32Karat软件。各组分的相对迁移时间(tR)定义为组分的迁移时间(tm)与内标物(即溶剂甲醇)峰的迁移时间(ts

参考文献

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