药疹患者外周血淋巴细胞亚群的检测及其意义

作者:谭飞;莫小辉;陈佳;章楚光;胡婷婷;吴飞;宋宁静;顾军 刊名:国际检验医学杂志 上传者:王员

【摘要】目的分析药疹患者外周血淋巴细胞亚群的变化。方法将18例初诊药疹患者作为药疹组,根据致敏药物的不同将其分为头孢菌素组(n=9)、青霉素组(n=5)及中药组(n=4),将20例健康体检者作为对照组。应用流式细胞仪检测其外周血T淋巴细胞(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+)、B淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK)和自然杀伤T淋巴细胞(NKT)所占百分比及其绝对计数。结果药疹组患者外周血T淋巴细胞(CD3+、CD3+CD4+)、B淋巴细胞和NKT细胞所占百分比与对照组的差异有统计学意义(P<0.05);药疹组患者CD3+CD8+淋巴细胞所占百分比与对照组的差异无统计学意义(P>0.05),而其T、B淋巴细胞亚群的绝对计数与对照组的差异有统计学意义(P<0.05)。结论药疹患者外周血CD3+、CD3+CD4+淋巴细胞所占百分比降低,NKT细胞所占百分比增高,这可能与患者免疫调节有关。

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药疹是药物通过注射、口服、吸入等途径进入人体后导致皮肤黏膜病理改变的药物不良反应。药疹的发病机制目前尚不完全清楚,大多数药疹为免疫介导的变态反应,淋巴细胞在药疹免疫应答中发挥重要作用[1-2]。淋巴细胞不仅大量存在于患者的皮损部位,有研究表明,30%~50%药疹患者的外周血淋巴细胞可被致敏药物刺激而发生转化[3]。本研究采用流式细胞术对18例药疹患者和20名健康成年人外周血淋巴细胞亚群进行检测,以了解药疹患者淋巴细胞亚群的比例和绝对数量是否存在差异以及淋巴细胞分布特征,评价药疹患者的免疫状态。1资料与方法1.1一般资料收集2012~2013年于本院住院治疗的初诊药疹患者18例,并将其作为药疹组,其中,男5例,女13例;年龄22~80岁;根据致敏药物的不同将其分为头孢菌素组(9例,平均年龄51.5岁)、青霉素组(5例,平均年龄49.9岁)及中药组(4例,平均年龄65.7岁);患者有明确用药史,潜伏期1~13d,过敏史不详;皮损以麻疹样或猩红热样发疹型药疹为主,住院3~10d后皮损消退,预后良好。将本院同期20例健康体检者作为对照组,其中,男10例,女10例;年龄21~63岁,平均42.8岁。1.2主要仪器与试剂淋巴细胞亚群检测采用EPICSXL分析型流式细胞仪(美国Beckman公司)。T细胞亚群检测试剂[单克隆抗体CD3-藻红蛋白-花青苷5(phycoerythrincyanin5,PC5)/CD4-藻红蛋白(phycoerythrin,PE)/CD8-藻红蛋白-德克萨斯红(phycoerythrinandTexasRedtandem,ECD)/CD45-异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)]、B细胞亚群(CD19-PC5)、自然杀伤细胞(naturalkillercell,NK)[CD3-FITC/CD(16+56)-PE]和自然杀伤T淋巴细胞(naturalkillerTlymphocytes,NKT)[CD3-FITC/CD(16+56)-PE]检测试剂以及红细胞溶解液和细胞计数液均为美国Beckman公司产品。1.3实验方法患者入院时采集2mL抗凝静脉血,淋巴细胞亚群检测分为2管,分别加入100L抗凝静脉血,10L四色标记单克隆抗体CD3/CD4/CD8/CD45,10L双标记单克隆抗CD3/CD(16+56)和10L单标记CD19,室温避光温育15min,加500L红细胞溶解液作用20min,再加入500L生理盐水和细胞计数液100L,混匀后上流式细胞仪分析。流式细胞仪每次获取10000个细胞,T淋巴细胞亚群检测利用CD45/SSC设定淋巴细胞门,B淋巴细胞、NK细胞和NKT细胞检测利用FSC/SSC设定淋巴细胞门。14统计学处理采用SPSS13.0软件进行统计学分析,计量资料用xs表示,组间比较采用独立样本t检验,以=0.05为检验水准,以P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1外周血淋巴细胞亚群的检测流式细胞仪检测,药疹组患者外周血可见CD3+淋巴细胞分为2群,其中CD3分子表达较强的一群T淋巴细胞主要为CD4-CD8-双阴性细胞,其CD3的表达强度与NKT细胞一致;而对照组受检者CD3+淋巴细胞中CD4-CD8-双阴性细胞极少。2.2外周血淋巴细胞亚群百分比的检测头孢菌素、青霉素组患者外周血CD19+淋巴细胞所占百分比低于对照组(P<0.05);药疹组患者外周血CD3+、CD3+/CD4+淋巴细胞所占百分比低于对照组(P<0.05),而头孢菌素、青霉素、中药组患者外周血CD3+CD16

参考文献

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