Rap1基因在斑马鱼胚胎早期发育过程中的时空表达谱研究

作者:杨小燕[1];何志旭[1,2];舒莉萍[2,3];金皎[1];黄璟[1];吴莎莎[1];马健娟[1] 刊名:重庆医学 上传者:汤景泰

【摘要】目的选择斑马鱼作为实验动物模型,研究Rap1基因在胚胎早期发育过程中的时空表达规律。方法从斑马鱼胚胎cDNA中克隆Rap1基因片段,将Rap1基因片段和pCS2+质粒进行体外连接重组,重组质粒经双酶切、菌落聚合酶链反应(PCR)及测序鉴定正确后,经T3RNA体外转录体系合成DIG标记的Rap1基因反义mRNA探针,采用整胚原位杂交方法检测Rap1在斑马鱼胚胎早期发育过程的表达情况。结果在斑马鱼胚胎0.75hpf的细胞分裂连接处、3.70hpf和6.00hpf的动物极、12.00~72.00hpf的脊索神经部位均可见Rap1基因的阳性杂交信号。结论Rap1基因在斑马鱼脊索神经系统的早期发育过程中可能起到重要的调控作用。

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2748 论 著 ·基础 研 究 doi:10.3969/j.issn.1671—8348.2016.2O.004 重庆 医学 2016年 7月第 45卷第 2O期 Rapl基 因在斑马鱼胚胎早期发 育过程中的时空表达谱研究 杨 小燕 ,何 志旭 ,舒 莉萍。 ,金 皎 ,黄 碌 ,吴 莎 莎 ,马健娟 (1.贵州医科 大学附属 医院儿科 550004;2.贵州医科 大学组织工程与干细胞实验 中心 550004; 3.贵州医科大学免疫学教研 室,贵阳 550004) [摘要] 目的 选择 斑马鱼作为 实验动物模型 ,研 究 Rapl基 因在 胚胎早 期发育过 程 中的 时空表达规 律。方法 从 斑马 鱼 胚胎 cDNA 中克隆 Rapl基 因片段 ,将 Rapl基 因片段和 pCS2+质粒进 行体 外连 接重 组,重组质 粒经 双酶切 、菌落聚合 酶链反应 (PCR)及测序鉴定正确后 ,经 T3RNA体外转录体 系合成 DIG标记 的 Rapl基 因反 义 mRNA探 针 ,采 用整胚原 位杂 交方法检测 Rapl在斑 马鱼胚胎早期发 育过程 的表 达情 况。结果 在 斑马 鱼胚 胎 0.75 hpf的细胞分 裂连接 处、3.70 hpf和 6.O0 hpf的动物 极 、12.0072.00 hpf的脊索神经部位均可见 Rapl基 因的阳性 杂交信号 。结论 Rapl基 因在 斑马鱼脊 索神 经 系统 的早期发 育 过程 中可能起到重要 的调控作 用。 [关键 词] Rapl基 因;斑 马鱼 ;原位 杂交;基 因表达 [中图分类号] Q132.4 [文献标识码] A [文章编号] 1671—8348(2016)20—2748—04 Spatiotemporal expression spectrum of Rap1 gene in zebrafish early development process Yang Xiaoyan ,He Zhixu ’ ,Shu Liping ,Jin Jiao ,Huang Jing ,Wu Sasa ,Ma Jianjuan (1.Department of Pediatrics,Affiliaced Hospital of Guizhou University,Guiyang,Guizhou 550004,China;2.Tissue Engineeringand Stem Cell Research Center,Affiliated Hospital of Guizhou University,Guiyang,Guizhou 550004,China; 3.Teaching and Researching Section of Immunology,Guizhou Medical University,Guiyang,Guizhou 550004,China) [Abstract] Objective To choose zebrafish as the experimental animal model for studying the spatiotemporal expression rule of rapl gen in zebrafish embryo early development process.M ethods The Rapl gene fragment was cloned from the zebrafish em by— oscDNA,then the Rap1 gene fr

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