KM小鼠糖尿病动物模型的建立

作者:张俭;刘杰;伍贤进 刊名:江苏农业科学 上传者:李佩玲

【摘要】KM小鼠腹腔注射不同剂量四氧嘧啶(Alloxan,ALX),利用方差分析,比较四氧嘧啶剂量因素和禁食因素对KM小鼠建模效果的影响。结果表明,ALX 4个剂量组中,300 mg/kg组成活率最低,250 mg/kg成模稳定性最高,150 mg/kg小鼠自愈率最高,200 mg/kg建模效果最好。禁食后造模,小鼠成模率效果比非禁食组好。KM小鼠禁食12 h后,腹腔注射200 mg/kg的ALX,建模效果最佳。

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近年来,全球糖尿病发病率增长迅速,糖尿病已经成为继肿瘤、心血管病变之后第三大严重威胁人类健康的疾病,糖尿病的防治已经成为医学工作者的一个重要课题[1-2]。为了研究糖尿病的发病机理以及如何治疗糖尿病,建立相应的动物模型已成为人类研究糖尿病的重要手段之一[3]。目前国内外常采用药物法诱导急性糖尿病模型,诱导的化学药物主要为链脲佐菌素(streptozotoein,STZ)和四氧嘧啶(alloxan,ALX)[4]。链脲佐菌素用药量小,药物毒性小,但价格昂贵,限制了其使用。四氧嘧啶使用安全、可靠,但目前在使用四氧嘧啶的剂量上,研究结果不一。本研究旨在利用四氧嘧啶制备稳定的糖尿病KM小鼠模型,探讨四氧嘧啶给药剂量、造模前是否禁食等因素对KM小鼠的影响[5],为制备典型稳定的糖尿病KM小鼠提供参考数据。1材料与方法1.1试验材料1.1.1试验动物试验用KM小白鼠来自中山大学实验动物研究中心(合格证号:粤检证字2007A064)。1.1.2试剂与仪器四氧嘧啶(美国Sigma公司产品,批号:A7413),ALX临用前用0.9%的生理盐水配制成3%的溶液。FreeStyle利舒坦血糖试纸(美国AbbottDiabetesCare公司,批号:01071208),FreeStyle利舒坦雅培血糖仪。微量进液器(上海安亭微量进样厂,250L)。1.2方法1.2.1动物分组选取体格健壮、身体完整的KM小鼠100只,体重在2530g之间,随机分成5组,每组2个重复,每重复10只,雌、雄各半。1.2.2ALX剂量试验把禁食12h后的4个试验组KM小鼠分别按150、200、250、300mg/kg剂量腹腔注射ALX进行建模。建模3、7、14、21d后,测量试验鼠的血糖和体重,计算成模率和成活率,确定ALX的最佳给药剂量。1.2.3禁食因素试验把分好组的KM小鼠,禁食组上午0900对小鼠开始禁食,12h后腹腔注射新配制的3%ALX溶液。非禁食组腹腔注射新配制的3%ALX溶液。所有试验组正常喂养3d后禁食12h时开始测量小鼠的血糖和体重,分别计算禁食组和非禁食组的成模率和死亡率。1.2.4数据处理所得数据均在Excel2003中处理,并进行平均数和方差分析。2结果2.1不同剂量的ALX对糖尿病小鼠血糖的影响由表1可见,随着ALX剂量的增加,KM小鼠的血糖值不断升高,以300mg/kg模型组血糖水平和成模率都最高,成活率最低;200mg/kg模型组血糖最稳定,成模率和死亡率都比较理想;150mg/kg模型组血糖不断向正常水平靠近,存在明显自愈现象。正常对照组血糖都处较低水平,未发现高血糖小鼠。与对照组相比,KM小鼠腹腔注射ALX,3d后血糖浓度有不同程度增加,有些出现稳定糖尿病症状。表1不同剂量ALX对糖尿病小鼠血糖的影响ALX(mg/kg)总样本数(只)血糖(mmol/L)1d3d7d14d21d成活率(%)成模率(%)CK104.50.94.70.95.00.55.20.55.20.91000150104.10.710.42.19.52.38.22.47.12.610010200104.81.617.52.317.02.617.72.717.93.110090250103.60.821.42.220.12.721.02.922.23.36090300104.00.725.61.724.62.425.32.225.52.4401002.2不同剂量的ALX对糖尿病小鼠体重的影响KM小鼠腹腔注射ALX后体重大多有降低的趋势,其中以300mg/kg模型组体重下降最大,出现典型的糖尿病

参考文献

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