液相色谱-串联质谱法测定食品中的泛酸

作者:郑国建;解楠;徐琼;杨保刚;彭亚锋;雷涛;宁啸骏 刊名:理化检验:化学分册 上传者:杨利宇

【摘要】提出用直接提取法将含有游离态泛酸的食品(如奶粉、米粉等)中将其分离;称取样品5g;加入淀粉酶0.2g和50mL水摇匀后;在(55±5)℃的水浴中振摇酶解30min;从此溶液中定量分取相当于0.5~5.0g的样品;加入泛酸钙[13C6、15N]同位素内标溶液100μL;加水至20mL;加入300g·L^-1乙酸锌溶液和150g·L^-1亚铁氰化钾溶液各0.4mL作为沉淀剂;加水定容至25.0mL;混匀;静置10min后离心2min;取其上清液并用0.22μm滤膜过滤;取其滤液按仪器工作条件进行液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)分析;用酶解法处理含有结合态泛酸的食品样品(谷、薯、肉、蛋、豆类及其制品1~5g;新鲜果蔬5~10g);于样品中加入pH8.1±0.1Tris缓冲溶液10mL和水40mL;并在121℃和加压条件下水解15min;冷却;加水定容至100.0mL;过滤;取滤液10.0mL加入泛酸钙同位素内标溶液100μL;及三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲溶液5mL;将溶液置于冰浴中;相继加入0.08mol·L^-1碳酸钠溶液0.1mL;0.02g·mL^-1碱性磷酸酶溶液0.4mL;0.5g·L^-1鸽子肝脏提取液0.2mL和水0.4mL;混合均匀;加入甲苯1滴;在37℃反应8h以上使泛酸游离;反应完成后;加水至20mL;以下操作同直接提取法从加入沉淀剂起;在LC分离中;采用WatersBEHC18色谱柱和以不同比例的(A)1%(体积分数)甲酸溶液和(B)乙腈组成的混合液作为流动相进行梯度洗脱;按质谱条件测得泛酸的峰面积;泛酸标准曲线的线性范围为10~1500μgL^-1;其检出限(3S/N)为3.0μg·kg^-1;按标准加入法进行回收试验;测得回收率为91.0%~105%;测定值的相对标准偏差(n=6)为0.46%~3.0%;应用本方法分析了奶粉及其他食品共53种样品;所测得泛酸含量的结果与国标法(微生物法)的测定结果的相对标准偏差均小于10%;并根据t检验的结果;表明本方法的测定值与国标法测定值之间无显著差异;

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PTCACPART B: CHEM. ANAL.) 3 m 工 作 商 报 DOI : 10.11973 lhjy-hx202003013 液相色谱-串联质谱法测定食品中的泛酸 郑国建,解 楠 ,徐 琼 ,杨保刚,彭 亚 锋 ,雷 涛 ,宁啸骏 (上海市质f l监督检验技术研究院,上 海 200233) 摘 要 :提出用直接提取法将含有游离态泛酸的食品(如 奶 粉 、米 粉 等 )中将其分离。称取样品 5 g ,加入淀粉酶0.2 g 和 50 m L 水摇匀后.在(55±5) °C'的水浴中振摇酶解30 min。从此溶液中定 量分取相当于0.5〜5.0 g 的样品.加入泛酸钙[13CS、K_N] 同 位 素 内 标 溶 液 100 PL ,加 水 至 20 mL, 加入300 g . L —1乙 酸 锌 溶 液 和 150 g • I,1亚铁氰化钾溶液各0.4 m L 作为沉淀剂.加水定容至25.0 m L,混 匀 ,静 置 10 min后离心2 min。取其上清液并用0.22 pm 滤 膜 过 滤 ,取其滤液按仪器 工作条件进行液相色谱-串联质谱法(I X -MS/MS)分析。用酶解法处理含有结合态泛酸的食品样 品(谷 、薯 、肉、蛋 、豆 类 及 其 制 品 1〜 5 g ,新 鲜 果 蔬 5〜 10 g),于 样 品 中 加 入pH 8.1士 0.1 T ris缓冲 溶 液 10 m L 和水40 m L,并 在 121 °C 和 加 压 条 件 下 水 解 15 min,冷却•加水定容至100.0 m L.过 滤 ,取 滤 液 10.0 m L加入泛酸钙同位素内标溶液100 yL .及 三 (羟 甲 基 )氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl) 缓冲溶液5 m L,将溶液置于冰浴中,相 继 加 入 0.08 mol • L 1碳 酸 钠 溶 液 0.1 m L,0.02 g • ml,1碱 性鱗酸酶溶液0.4 mL,0.5 g . L 1鹤子肝脏提取液0.2 m L 和水0.4 m L.混 合 均 匀 ,加 入 甲 苯 1 滴 ,在 37 °C 反应8 h 以上使泛酸游离。反应完成后.加水至20 mL,以下操作同直接提取法从加入沉 淀剂起。在 L C 分 离 中 ,采 用WatersBEH (:,8色谱柱和以不同比例的(A ) 1 % (体积分数)甲酸溶 液和(B )乙腈组成的混合液作为流动相进行梯度洗脱,按 质 谱 条 件 测 得 泛 酸 的 峰 面 积 。泛酸标准 曲 线 的 线 性 范 围 为 10〜 1 500 ygL 1,其检出限(3S/N )为 3.0 pg . kg 1。按标准加入法进行回收 试 验 ,测 得 回 收 率 为 91.0%〜105 % , 测定值的相对标准偏差(《 = 6 ) 为 0.46 % 〜3.0%。应用本方法 分析了奶粉及其他食品共5 3种样品,所测得泛酸含量的结果与国标法(微生物法)的测定结果的相 对 标 准 偏 差 均 小 于 1 0 % , 并 根 据 / 检 验 的 结 果 ,表 明 本 方 法 的 测 定 值 与 国 标 法 测 定 值 之 间 无 显 著 差异。 关键词:游离泛酸;总泛酸;液相色谱_串联质谱法;食品 中图分类号:0657.63 文献标志码:A 文章编号:1001-4020(2020)03-0326-06 含 量 时 ,就需要使用泛酸巯基乙胺酶和磷酸酶将结 合 态 的 泛 酸 游 离 出 来 才 可 以 进 行 测 定 6 ],提取方法 主要有直接提取法或酶解法。直接提取法用于提取

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