小鼠Akt基因真核表达载体的构建及鉴定

资源类型: 资源大小: 文档分类:医药、卫生 上传者:张友瑞

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【作者】 蒲静  俞晓丽  马会明  李昕  王蒙蒙 

【关键词】真核表达载体 构建 转染 

【出版日期】2018-01-01

【摘要】目的构建含有小鼠Akt基因以及绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pDoubleEx-EGFPAkt1。方法以小鼠卵巢RNA为模板,通过RT-PCR扩增Akt,并将其克隆到pDoubleEx-EGFP载体中。通过酶切和测序鉴定,构建真核表达载体pDoubleEx-EGFP-Akt1。之后转染人卵巢癌上皮细胞SKOV-3。结果经测序鉴定,构建的Akt基因序列与野生型Akt序列完全相符。将pDoubleEx-EGFP-Akt1转染进入人卵巢癌上皮细胞SKOV-3,观察到稳定转染后的细胞有明显绿色荧光蛋白表达。结论成功构建含有小鼠Akt基因的真核表达载体pDoubleEx-EGFP-Akt1,为进一步研究Akt基因的功能提供初步的实验基础。

【刊名】宁夏医学杂志

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