维生素E对神经细胞氧化应激损伤的保护作用

作者:马丽君;曹池;田建英;李宁康 刊名:宁夏医科大学学报 上传者:郝瑞城

【摘要】目的探讨维生素E对FeSO4和H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤模型的保护作用及其可能的机制。方法采用FeSO4和H2O2作用产生自由基的方法诱导建立PC12细胞氧化应激损伤模型。MTT比色法测定细胞活性,硫代巴比妥酸法测定MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力,免疫细胞化学法测定α7烟碱型乙酰胆碱受体(nAchR)阳性表达及dot blot法测定α7nAchR亚单位水平。结果与FeSO4和H2O2损伤组(0.136±0.015)进行比较,维生素E组(0.178±0.025)和EGCG组(0.181±0.029)均能明显提高PC12细胞的活细胞数量(P<0.01),提高SOD活力(15.29±0.79)U.mL-1对(17.37±0.76)U.mL-1、(17.90±0.44)U.mL-1,P<0.01,有效降低MDA的含量(4.51±0.20)mmol.L-1对(3.39±0.11)mmol.L-1、(3.20±0.15)mmol.L-1,P<0.01,明显上调α7nAChR的表达(0.0910±0.0272)对(0.1895±0.0392)、(0.1956±0.0322),P<0.01。结论维生素E对FeSO4和H2O2诱导建立PC12细胞氧化损伤模型具有明显的保护作用,其作用机制可能与维生素E清除自由基,抑制脂质过氧化过程和保护α7nAchR有关。

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宁夏医科大学学报 Journal of Ningxia Medical University 第 34 卷 8 期2012 年 8 月 文章编号:1674 -6309( 2012) 08 -0768 -03 ·论著· 维生素 E 对神经细胞氧化应激损伤的保护作用 马丽君1,2, 曹 池1, 田建英2, 李宁康2 ( 1. 宁夏医科大学总医院宁夏人类干细胞研究所,银川 750004; 2. 宁夏医科大学基础医学院,银川 750004) 摘要: 目的 探讨维生素 E 对 FeSO4 和 H2O2 诱导 PC12 细胞氧化应激损伤模型的保护作用及其可能的机制。方法 采用 FeSO4 和 H2O2 作用产生自由基的方法诱导建立 PC12 细胞氧化应激损伤模型。MTT 比色法测定细胞活性,硫代巴比妥酸法测定 MDA 含量,黄嘌呤氧化酶法测定 SOD 活力,免疫细胞化学法测定 α7 烟碱型乙酰胆碱受体( nAchR) 阳性表达及 dot blot 法测定 α7nAchR 亚单位水平。结果 与 FeSO4 和 H2O2 损伤组 ( 0. 136 ±0. 015) 进行比较,维生素 E 组( 0. 178 ±0. 025) 和 EGCG 组( 0. 181 ±0. 029) 均能明显提高 PC12 细胞的活细胞数量( P < 0. 01) ,提高 SOD 活力( 15. 29 ± 0. 79) U·mL -1 对( 17. 37 ± 0. 76) U·mL -1、( 17. 90 ± 0. 44) U·mL -1,P < 0. 01,有效降低 MDA 的含量( 4. 51 ± 0. 20) mmol·L -1 对( 3. 39 ± 0. 11) mmol·L -1、 ( 3. 20 ±0. 15) mmol·L -1,P < 0. 01,明显上调 α7nAChR 的表达( 0. 0910 ± 0. 0272) 对( 0. 1895 ± 0. 0392) 、 ( 0. 1956 ±0. 0322) ,P <0. 01。结论 维生素 E 对 FeSO4 和 H2O2 诱导建立 PC12 细胞氧化损伤模型具有明显的保护作用,其作用机制可能与维生素 E 清除自由基,抑制脂质过氧化过程和保护 α7nAchR 有关。关键词: 维生素 E; α7nAchR; 神经细胞 中图分类号: Q813 文献标识码: A 收稿日期:2012 -01 -30 基金项目: 国家自然科学基金项目( 81060231,81160338) ; 国家中医药管理局项目( 04 -05zp62) 作者简介: 马丽君( 1981 -) ,女( 回族) ,技师,硕士,从事神经干细 胞基础研究。 通信作者: 田建英,女,教授,硕士研究生导师,研究方向老年痴呆的发病机制及防治。E - mail: jianyingt@hotmail. com 在神经系统疾病的发生中,氧化应激是重要的致病因素,维生素 E 又称生育酚,主要存在于细胞线粒体膜和内质网上,酚性羟基可将活泼的 H 原子给予自由基,变成稳定的生育醌。研究表明 VitE 是抗氧化剂,可保护神经元免受氧自由基的损害,减缓阿尔茨海默病( AD) 的病程[1],而有关 VitE 对α7nAchR 表达的影响近年尚未见报道。本实验以PC12 为神经细胞模型,α7nAchR 为靶点探讨 VitE 预处理细胞,观察其对神经细胞的保护作用。 1 材料与方法 1. 1 细胞和试剂 PC12 细胞购于中国科学院上海细胞生物研究所。兔抗人 α7 多克隆抗体( Santa Cru

参考文献

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