星点设计-效应面法优化川麦冬多糖的提取工艺

作者:银玲;陈鸿平;彭月;韦正;刘荣;刘友平 刊名:中国食品添加剂 上传者:马秀梅

【摘要】星点设计—效应面法优选川麦冬多糖的提取工艺。以料液比、提取时间、提取温度为自变量,以川麦冬多糖提取率为因变量,通过对自变量各水平的二项式拟合,用效应面法选取最佳工艺,并进行预测分析。确定的最佳工艺料液比1∶35、温度75℃、提取2h,提取次数1次。提取预测值与验证值偏差为2.04%。二项式拟合复相关系数平方R2=0.9627。结论:采用星点设计-效应面法优化川麦冬的多糖提取工艺具有方法简便,精密度高,可预测性较好的优点。

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麦冬为百合科植物麦冬O.japonicus(L.f)Ker-Gawl.的干燥块根。产自四川者习称川麦冬。麦冬作为药食两用名贵中药之一,具有养阴润肺,益胃生津,清心除烦的功效,临床主要用于肺燥干咳,阴虚痨嗽,喉痹咽痛,津伤口渴,内热消渴,心烦失眠,肠燥便秘[1]。多糖为麦冬主要化学成分之一具有广泛的生物活性,其药用和保健价值极高,临床药理作用表现为抗心肌缺血、降血糖、耐缺氧、抗过敏、抗衰老、抗氧化等[2-3]。多糖常用的提取方法有热水浸提法、稀碱浸提法、酸浸提法和酶法,而植物多糖一般多采用热水浸提。且在提取之前根据药材化学成分不同进行一定的预处理,本文在浸提前采用95%乙醇脱脂处理即为除去麦冬中含有的脂溶性成分。目前国内对于麦冬多糖类成分提取工艺研究常使用正交设计法,采用线性数学模型,虽具有操作简便,试验次数少等优点,但精密度不佳。本文引入目前国外常用的试验设计方法[4-5]星点设计-效应面法(Centralcompositedesign-responsesurfacemethodology)对川麦冬多糖提取工艺进行优化,旨为川产道地药材的开发和利用提供科学依据。1仪器与试药SB25-12D型超声波清洗器(宁波新艺超声设备有限公司);UV-1100型紫外-可见分光光度计(上海天美科技有限公司);DZKW-4型电子恒温水浴锅(北京中兴伟业仪器有限公司);BP211D(十万分之一)、BP121S(万分之一)型电子分析天平(德国Sartorius公司)。D-果糖对照品(嘉兴市精博化学品有限公司,供含量测定用,批号20100609);所用水为蒸馏水,其他试剂均为分析纯;川麦冬(购于成都荷花池中药材市场,经成都中医药大学标本馆卢先明教授鉴定为道地药材川麦冬)。2方法与结果2.1麦冬多糖的含量测定2.1.1对照品溶液的制备取果糖对照品适量,精密称定,置棕色容量瓶中,加水制成每1mL含0.302mg的溶液,作为对照品储备液。2.1.2供试品溶液的制备取药材粗粉约0.1g,精密称定,置250mL圆底烧瓶中,加入95%乙醇25mL,80下回流脱脂2h,过滤,药渣挥干溶剂,加水20mL,85下回流提取2h,趁热过滤,滤液定容至250mL,即得。2.1.3最大吸收波长的确定多糖经苯酚浓硫酸处理后,在490nm左右有最大吸收。将果糖对照品与供试品经苯酚浓硫酸处理后,于400600nm波长下扫描,结果对照品与供试品均在489nm处有最大吸收,故选取489nm为测定波长。2.1.4标准曲线的绘制精密量取对照品储备液2mL定容至10mL,得对照品溶液,分别精密量取对照品溶液0.3、0.5、0.8、1.0、1.2、1.5、1.8mL,置具塞试管中,加水补足至2mL,摇匀,加5%苯酚溶液1mL,摇匀,再迅速加入浓硫酸5mL,摇匀,放置10min,于40水浴保温15min,取出,冷水迅速冷却,以相应的试剂为空白,照紫外-可见分光光度法在489nm波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。得回归方程y=84.387x+0.0121,R=0.9995,结果表明果糖在2.213.6gmL-1范围内与吸光度呈良好的线性关系。2.1.5精密度试验精密量取对照品溶液1.0mL,照“2.1.4”的方法,自“加水补足至2mL”起,依次显色、测吸光度值,重复测定吸光度值6次,计算吸光度值的RSD为0.17%,表明精密度良好。2.1.6稳定性试验取药材粗粉约0.1g,精密称定,按“2.1.2”项下的方法制备供试品溶液,取0.3mL供试品溶液,照“2.1.4”的方法,自“加水补足至2

参考文献

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