同色兜兰种子非共生萌发试验

作者:刘其府;傅燕艳;曾宋君;吴坤林;张建霞;段俊 刊名:广东农业科学 上传者:曹婷婷

【摘要】研究了基本培养基、种子成熟度及次氯酸钠溶液处理对同色兜兰种子萌发的影响。结果表明,授粉后150 d的种子在1/4MS基本培养基附加0.5 mg/L NAA、100 mL/L椰子水、1.0 g/L活性炭和20 g/L蔗糖的培养基上萌发率最高,播种后90 d萌发率可达70.3%;授粉后240 d的种子在含有0.5%有效氯的次氯酸溶液中处理40 min能最有效地提高种子的萌发率,成熟种子的萌发率从14.3%提高到69.0%。

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同色兜兰Paphiopedilumconcolor(Bateman)Pfitz.是兰科(Orchidaceae)兜兰属植物,其花型奇特,是珍稀的观赏植物,同时又是重要的杂交亲本[1]。据“国际散氏兰花种杂种登记目录”(Sarder’slistoforchidhybrids)记载,截至2012年4月1日,以同色兜兰为亲本已有142个杂交种被登录[2]。同色兜兰原产我国广西西部、贵州南部、云南东南部至西南部,柬埔寨、老挝、缅甸、泰国、越南等国也有分布,在野外生长于海拔3001400m荫蔽岩壁缝隙中或灌木丛生的山坡、疏林下多石和排水良好之地[3-4]。与其他兜兰属植物一样,由于过度采挖和其原生地环境的破坏,同色兜兰已濒临灭绝,属于“野生动植物濒危物种国际贸易公约”(ConventiononInternationalTradeinEndangeredspeciesofWildFaunaandFlora,CITES)附录中的保护对象而被禁止贸易[5]。同色兜兰的常规繁殖常可采用分株繁殖,但繁殖速度慢、繁殖率低,远不能满足保护与商业市场的需要;同时,由于其种子无胚乳,在野外需与真菌共生才能萌发,发芽率极低;通过无菌播种能获得大量种苗。王莲辉等[6]曾对同色兜兰的无菌播种和快速繁殖进行了研究,但采用的基本培养基仅有MS和1/2MS,未曾针对不同成熟度的种子的萌发率及其利用次氯酸溶液处理提高成熟种子的萌发率进行探讨。对同色兜兰的无菌播种进行深入研究,提高种子萌发率,有利于其种苗的快速繁殖并生产出大量的种苗,减轻采集压力,对同色兜兰种质资源的保护和可持续利用具有重要意义。1材料与方法1.1种子来源和外植体消毒引种的同色兜兰植株种植于中国科学院华南植物园兰花保育温室中。在开花期间进行人工异株授粉,收集授粉后不同发育时期的果实为试验材料。消毒时,先用蘸有70%酒精的棉球擦拭干净蒴果表面,接着浸泡于70%酒精中30s,再用0.1%升汞消毒15min,无菌水冲洗5次,最后吸干蒴果表面水分,沿中缝线纵向切开蒴果,刮出种子于无菌水中制成悬浮液用于播种。1.2基本培养基对种子萌发的影响为了研究基本培养对同色兜兰种子萌发的影响,取授粉后150d的蒴果为试验材料,所用基本培养基包括MS[7]、1/2MS、1/4MS、1/8MS、KC[8]、VW[9]、RE[10]、ThomaleGD(简称GD)[11]、HyponexN026(简称H26)[12]和HyponexN016(简称H16)[13]等10种。根据Zeng等[13-14]对彩云兜兰、亨利兜兰等80706050403020100种子萌发率(%)含0.5%有效氯的次氯酸钠含1.0%有效氯的次氯酸钠10203040506070处理时间(min)图3次氯酸钠溶液处理对种子萌发率的影响80706050403020100种子萌发率(%)MS1/2MS1/4MS1/8MSKCVWREGDH26H16基本培育基图1基本培养基对种子萌发率的影响80706050403020100种子萌发率(%)306090120150180210240270授粉时间(d)图2种子成熟度对种子萌发率的影响2.3次氯酸钠溶液处理对同色兜兰种子萌发的影响利用次氯酸钠溶液处理授粉后240d的成熟的同色兜兰种子能显著提高萌发率。由图3可知,种子的萌发率受次氯酸钠溶液浓度和处理时间的影响,其中利用含0.5%有效氯的次氯酸钠溶液中处理50min的效果最好,能将未处理的成熟的种子的萌发率从14.3%提高到69.0%,但处理超过50min萌发率降低。采用含1.0%有效氯的次氯

参考文献

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