美花石斛种子无菌播种繁殖技术

作者:耿秀英;李泽生 刊名:中国热带农业 上传者:秦佳佳

【摘要】采用美花石斛种子在无菌条件下播种繁殖,经过圆球茎诱导,分化、生根培养,约180d的培养可获得大量无菌组培苗,再经过10~20d炼苗,可得到大量美花石斛无菌种苗;将达到标准的瓶美花石斛瓶苗,移到棚内炼苗,假植过渡60d后,便可出圃栽培。

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美花石斛(Dendrobiumloddigesiirolfe)为附生植物,生于海拔11001800m的山地林木树上[1]。美花石斛具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳等功效,用于治疗热病伤津、口干烦渴、病后虚热等多种病症[2]。近年来,由于过度采伐,美花石斛野生资源已经濒临灭绝。美花石斛自然状况下种子的发芽率很低,而且在自然状况下发芽的种子,生长极其缓慢。用美花石斛种子进行无菌播种繁殖,即把美花石斛种胚接种到适宜的培养基上,进行组织培养,便可以在较短时间内得到大量的种苗。美花石斛种子无菌播种繁殖技术流程为采种种子消毒接种诱导圆球茎增殖分化壮苗生根炼苗脱瓶过渡出圃。1外殖体采集和消毒11月,采美花石斛植株健壮、果实饱满、成熟、无病虫的硕果为外殖体。将采集的外殖体硕果带回室内,用自来水冲洗干净,在无菌条件下用75%的酒精表面消毒12min后,用5%升汞浸泡1520min,再用5%的次氯酸钠浸泡1015min,然后用无菌水漂洗35次,在超净工作台上,切开硕果,将种粉均匀涂布在准备好的培养基上[3]。2圆球茎诱导、增殖培养美花石斛种胚在3/4MS培养基中,经过20d培养,种粉开始转绿;20d后,可看到有部分圆球状的种球,逐渐变大,数量增多。这时可将其转接到添加有土豆和香蕉的培养基上[4],进行增殖培养,继续获得更多圆球茎,重复56次转接扩大增殖倍数,待增加种球数量达到需要的数量。增殖代数控制在6代以内。3圆球茎的分化培养圆球茎诱导45d后和圆球茎增殖培养过程就会有部分种球凸起,凸起处抽出第一片叶,圆球茎分化出小苗。将获得的圆球茎转入1/2MS+10%土豆+10%香蕉的培养基中进行培养,45d后,90%以上的圆球茎都可以分化,获得株高0.5cm左右的美花石斛幼苗。4壮苗、生根培养将分化出的幼苗转入3/4MS+NAA0.11.0mg/L+BA0.10.5mg/L再附加有土豆、香蕉和椰子水的添加物中进行培养,待幼苗长到23.5cm高时,转入3/4MS+香蕉土豆和MS+NAA0.10.5mg/L+BA0.050.1mg/L进行生根3060d,株高达5cm,生根45条以上即可进行室外炼苗移栽。5炼苗为了提高美花石斛组培苗移栽的成活率,将达到标准出瓶的瓶苗,移在炼苗棚内,使之逐渐接受适度的自然光1525d。炼苗的大棚要搭盖遮阴网,避免阳光直射。6脱瓶假植经过炼苗的美花石斛瓶苗,便可开盖,取出植株进行清洗。清洗时,轻轻彻底地洗掉沾在根上的培养基,以免栽后发霉,注意种苗不受或少受创伤。清洗干净后用0.1%多菌灵或0.3%0.5%的高锰酸钾消毒杀菌5min后便可进行移栽。美花石斛的根是附生性,有明显的好气性和浅根性。因此,移栽的基质选择疏松透气好的木屑、水苔、椰子壳进行假植。假植头35d应特别注意做好保温、保湿、遮光等管理工作,以喷雾为主,每天喷雾,基质干可23d浇1次透水。假植30d后,增喷一些营养元素,促进小苗生长,增强小苗抵抗力。7出圃假植过渡60d后,美花石斛组培苗就可以出圃,移到室外栽培。美花石斛种子无菌播种繁殖技术@耿秀英$云南省德宏热带农业科学研究所!云南瑞丽678600 @李泽生$云南省德宏热带农业科学研究所!云南瑞丽678600采用美花石斛种子在无菌条件下播种繁殖,经过圆球茎诱导,分化、生根培养,约180d的培养可获得大量无菌组培苗,再经过1020d炼苗,可得到大量美花石斛无菌种苗;将达到标准的瓶美花石斛瓶苗,移到棚内炼苗,假植过渡60d后,便可出圃栽培。美花石斛;;无菌;;播种;;繁殖;;圆球茎[1]云南植物研究所.云南植物志(第1卷)[M].北京:科学出

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