促酰化蛋白对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的影响

作者:刘婧;胡秀芬;卢慧玲;温宇; 刊名:医学研究杂志 上传者:何勇

【摘要】目的观察胰岛素抵抗状态下3T3-L1成熟脂肪细胞促酰化蛋白(acylation stimulating protein,ASP)刺激下脂代谢关键酶(LPL、HSL、perilipin、DGAT)基因表达的影响,以及胰岛素经典信号通路(IRS-1、PI_3K)蛋白表达的影响。方法 3T3L-1脂肪细胞给予不同浓度(0、0.125、0.5、1.0mmol/L)油酸及棕榈酸孵育过夜。real-time PCR方法定量检测ASP刺激下脂肪细胞LPL、HSL、perilipin、DGAT基因表达水平。Western blot法检测ASP和INS刺激下脂肪细胞HSL、perilipin、IRS-1、PI_3K蛋白表达水平。结果 ASP促进脂代谢关键酶HSL、LPL、perilipin和DGAT的基因表达。其中0.5mmol/L油酸组增加5倍HSL、1.87倍LPL、6.87倍perilipin、2.5倍DGAT基因表达(P<0.01)。1.0mmol/L油酸组增加3.26倍HSL、2.98倍LPL、5.46倍perilipin、2倍DGAT基因表达(P<0.01)。0.5mmol/L棕榈酸组增加1.98倍HSL、4.63倍DGAT基因表达(P<0.05)。胰岛素和ASP刺激下显著增加脂肪酸孵育的成熟脂肪细胞HSL、perilipin、PI_3K蛋白的表达。胰岛素刺激状态下油酸组增加1.75倍HSL、1.27倍perilipin、2.59倍PI_3K蛋白的表达(P<0.01),棕榈酸组增加85%(P<0.05)HSL、96%(P<0.05)perilipin、3.66倍(P<0.01)PI_3K蛋白的表达。ASP刺激状态下油酸组增加76%(P<0.05)HSL、86%(P<0.05)perilipin蛋白的表达,棕榈酸组增加76%(P<0.05)perilipin、1.27倍(P<0.01)PI_3K蛋白表达。胰岛素及ASP刺激下脂肪细胞IRS-1蛋白表达差异无统计学意义。结论胰岛素和ASP可增加脂代谢关键酶HSL、perilipin蛋白及经典胰岛素信号通路PI_3K蛋白的表达。ASP可以从不同程度上增加糖脂代谢关键酶HSL、LPL、perilipin和DGAT基因的表达,通过增加这些酶的表达,提高酶的敏感度,参与调节脂肪细胞糖脂代谢。

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基 金 项 目: 国家自然科学基金青年科学基金资助项目 ( 30800385) ; 教育部新教师基金资助项目( 200804871059) 作者单位:430030 武汉,华中科技大学附属同济医院儿科( 胡秀芬、卢慧玲、温宇) ; 武汉市儿童医院( 刘婧) 通讯作者: 温宇,副主任医师,电子信箱:2721837622@ qq. com 促酰化蛋白对 3T3 - L1 脂肪细胞糖脂代谢的影响 刘 婧 胡秀芬 卢慧玲 温 宇 摘 要 目的 观察胰岛素抵抗状态下3T3 - L1 成熟脂肪细胞促酰化蛋白( acylation stimulating protein,ASP) 刺激下脂代谢关键酶( LPL、HSL、perilipin、DGAT) 基因表达的影响,以及胰岛素经典信号通路( IRS -1、PI3K) 蛋白表达的影响。方法 3T3L -1 脂肪细胞给予不同浓度( 0、0. 125、0. 5、1. 0mmol/L) 油酸及棕榈酸孵育过夜。real - time PCR 方法定量检测 ASP 刺激下脂肪细胞 LPL、HSL、perilipin、DGAT 基因表达水平。Western blot 法检测 ASP 和 INS 刺激下脂肪细胞 HSL、perilipin、IRS -1、PI3K 蛋白表达水平。结果 ASP 促进脂代谢关键酶 HSL、LPL、perilipin 和 DGAT 的基因表达。其中 0. 5mmol/L 油酸组增加 5 倍 HSL、1. 87 倍 LPL、6. 87 倍 perilipin、2. 5 倍 DGAT 基因表达( P < 0. 01) 。1. 0mmol/L 油酸组增加 3. 26 倍 HSL、2. 98 倍 LPL、5. 46 倍 perilipin、2 倍 DGAT 基因表达( P <0. 01) 。0. 5mmol/L 棕榈酸组增加 1. 98 倍 HSL、4. 63 倍 DGAT 基因表达( P <0. 05) 。胰岛素和 ASP 刺激下显著增加脂肪酸孵育的成熟脂肪细胞 HSL、perilipin、PI3K 蛋白的表达。胰岛素刺激状态下油酸组增加 1. 75 倍 HSL、1. 27 倍 perilipin、2. 59 倍 PI3K 蛋白的表达( P <0. 01) ,棕榈酸组增加 85% ( P < 0. 05) HSL、96% ( P < 0. 05) perilipin、3. 66 倍( P < 0. 01) PI3K 蛋白的表达。ASP 刺激状态下油酸组增加 76% ( P < 0. 05) HSL、86% ( P < 0. 05) perilipin 蛋白的表达,棕榈酸组增加 76% ( P <0. 05) perilipin、1. 27 倍( P <0. 01) PI3K 蛋白表达。胰岛素及 ASP 刺激下脂肪细胞 IRS -1 蛋白表达差异无统计学意义。结论胰岛素和 ASP 可增加脂代谢关键酶 HSL、perilipin 蛋白及经典胰岛素信号通路 PI3K 蛋白的表达。ASP 可以从不同程度上增加糖脂代谢关键酶 HSL、LPL、perilipin 和 DGAT 基因的表达,通过增加这些酶的表达,提高酶的敏感度,参与调节脂肪细胞糖脂代谢。关键词 脂肪细胞 胰岛素抵抗 促酰化蛋白 糖脂代谢关键酶 中图分类号 R3 文献标识码 A DOI 10. 11969/j. issn. 1673-548X. 2018. 02. 017 Effects of Acylation Stimulating Protein on

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