过表达miR-155对斑马鱼胚胎发育的影响

作者:黄梦圆;李德利;张加良;袁栎;王晖; 刊名:南京医科大学学报(自然科学版) 上传者:韩凯宁

【摘要】目的:探讨过表达mi R-155对斑马鱼胚胎发育的影响和机制。方法:利用q RT-PCR检测mi R-155在斑马鱼胚胎发育各阶段的表达;通过显微注射的方法将mi R-155 mimic转入斑马鱼胚胎,实现基因的过表达;利用q RT-PCR和Western blot方法检测过表达mi R-155后发育相关标志性基因的表达变化;利用ETS1的m RNA对过表达mi R-155的胚胎进行补救实验。结果:mi R-155在胚胎发育时期均有表达,在器官形成期表达量明显增高;过表达mi R-155导致斑马鱼胚胎发育迟缓、褪膜延迟、腹部及心包积液、尾部变短变粗,肝脏、小肠、心脏及肌肉发育相关标志性基因表达下调;ETS1能缓解过表达mi R-155所致发育畸形。结论:过表达mi R-155可能通过负向调控ETS1而影响斑马鱼胚胎肝脏、小肠、心脏及肌肉的发育。

全文阅读

自从第1个微小RNA(microRNA)基因Lin⁃4在线虫中被发现后,越来越多的研究显示microRNA参与增殖、分化、凋亡等多种细胞功能,并与糖尿病、心血管疾病、肿瘤等多种疾病的发生密切相关[1]。mi⁃ croRNA广泛存在于各种动植物中,在物种进化过程中,其序列和基因位置具有高度同源性和保守性,是一类在转录后水平调控基因表达的18~24个核苷酸的单链非编码RNA分子。microRNA主要通过其5′端第2~8个碱基所组成的“种子序列”与靶基因mRNA的 3′端非翻译区(3′UTR)互补配对,形成诱导 沉 默 复 合 体(RNA induced silencing complex,RISC),从而诱导靶基因mRNA的降解或抑制其翻译为蛋白而进行基因调控[2-3]。 过表达miR⁃155对斑马鱼胚胎发育的影响 黄梦圆1,李德利2,张加良1,袁 栎2,王 晖1* 1南京医科大学第一附属医院心内科,江苏 南京 210029;2南京医科大学生物化学与分子生物学系,江苏 南京 211166 [摘 要] 目的:探讨过表达miR⁃155对斑马鱼胚胎发育的影响和机制。方法:利用qRT⁃PCR检测miR⁃155在斑马鱼胚胎发育各阶段的表达;通过显微注射的方法将miR⁃155mimic转入斑马鱼胚胎,实现基因的过表达;利用qRT⁃PCR和Westernblot方法检测过表达miR⁃155后发育相关标志性基因的表达变化;利用ETS1的mRNA对过表达miR⁃155的胚胎进行补救实验。结果:miR⁃155在胚胎发育时期均有表达,在器官形成期表达量明显增高;过表达miR⁃155导致斑马鱼胚胎发育迟缓、褪膜延迟、腹部及心包积液、尾部变短变粗,肝脏、小肠、心脏及肌肉发育相关标志性基因表达下调;ETS1能缓解过表达miR⁃155所致发育畸形。结论:过表达miR⁃155可能通过负向调控ETS1而影响斑马鱼胚胎肝脏、小肠、心脏及肌肉的发育。 [关键词] miR⁃155;ETS1;斑马鱼;胚胎发育 [中图分类号] Q344 [文献标志码] A [文章编号] 1007⁃4368(2018)08⁃1028⁃06 doi:10.7655/NYDXBNS20180803 Effects of miR⁃155 overexpression on the development of zebrafish embryos HuangMengyuan1,LiDeli2,ZhangJialiang1,YuanLi2,WangHui1∗ 1Department of Cardiology,the First Affiliated Hospital of NMU,Nanjing 210029;2Department of Biochemistry and Molecular Biology,NMU,Nanjing 211166,China [Abstract] Objective:To explore the role and mechanism of miR⁃155 overexpression in the development of zebrafish embryos. Methods:TheexpressionofmiR⁃155duringeachstageofembryogenesiswasdetectedbyquantitativeRT⁃PCR. miR⁃155mimicwas microinjected to the 4 blastomeres of 4⁃cell stage emby

参考文献

引证文献

问答

我要提问