细颗粒物对斑马鱼胚胎发育的影响

作者:吴德生;王宏辉;袁建辉;王宏菊;赵琼辉;刘建军; 刊名:癌变·畸变·突变 上传者:李海江

【摘要】目的:探讨细颗粒物对斑马鱼胚胎发育的影响。方法:采集深圳市某小学楼顶雾霾天气的大气细颗粒物样本,将斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的细颗粒物(0、5、20、80、320、800μg/mL)混悬溶液中,在不同时间(0、2、4、6、8、16、24、48、72、96h)于体式显微镜下观察斑马鱼胚胎的孵化与存活情况。结果:与对照组相比,细颗粒物暴露48 h后,各剂量组均有胚胎死亡发生,并且在80、320、800μg/mL剂量组胚胎死亡率明显升高(死亡率均为100%),而胚胎孵化率则呈现随着剂量升高而降低的趋势,其中80μg/mL剂量组有较多胚胎出现不出膜现象,800μg/mL剂量组的胚胎在染毒48 h后全部死亡。经统计分析,细颗粒物对斑马鱼胚胎的半数致死量为(56.6±2.8)μg/mL。结论:细颗粒物可能影响斑马鱼胚胎发育,导致孵化失败和死亡。

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细颗粒物(fine particulate matter,PM2.5)是空气动全世界各国的广泛关注。力学直径小于2.5μm的颗粒,其粒径小,比表面积长期处在雾霾天气中,人体吸入越来越多颗粒大,易于富集空气中的有毒有害物质,并可以随着人物,附于其上的有毒有害物质不断地随着血液进入人的呼吸进入体内,甚至进入人体肺泡或血液循环系体,会对雌性或雄性的性腺产生直接或间接的毒性效统,直接导致心血管、呼吸系统等疾病,是大气环境应,人群中不育、性功能异常、月经周期紊乱等生殖中化学组成成分最复杂、危害最大的污染物之一[1-2]。功能发生异常的压力也随之增加[3-4]。然而,目前我们当前,PM2.5污染已成为突出的大气环境问题,引起对雾霾细颗粒物对胚胎发育的危害作用及其机制并不 十分清楚。因此,本文以模式生物斑马鱼胚胎为研究2结●果模型,探讨雾霾细颗粒物对胚胎发育的影响。2.1雾霾细颗粒物对斑马鱼死亡率的影响如图1所示,与对照组相比,各剂量组在暴露后41材料与方法h开始出现胚胎死亡的现象,80、320、800μg/m L剂量1.1主要仪器PM2.5混悬溶液组胚胎在暴露后48 h开始出现大量的死TH-1000 CII智能大容量空气细颗粒物(PM2.5)无亡,320、800μg/m L组死亡率达到100%。经过统计分碳刷采样器,购于武汉天虹仪表有限责任公司;石英析,PM2.5对斑马鱼胚胎的半数致死量为(56.6±2.8)滤膜购于美国Whatman公司;斑马鱼饲养系统购于北μg/m L。京爱生科技发展有限公司,HF212uv CO 2培养箱购于上海力新仪器有限公司,体式显微镜购自德国Leica显微120******系统贸易有限公司。100)1.2斑马鱼(%80率****对照组AB系斑马鱼,由深圳市疾病预防控制中心现代毒化**5μg/m L60孵20μg/m L理学实验室自有AB系种鱼繁殖提供。饲养于斑马鱼饲胎胚4080μg/m L养系统,光照周期14 h/10 h明暗交替,每天投食1次,********320μg/m L20挑选体长(3±1)cm的成年、健壮斑马鱼进行实验。********800μg/m L1.3斑马鱼胚胎收集02 4 6 8 16 24 48 72 96选择发育良好的5月龄性成熟斑马鱼18尾。雌雄t/h各9尾分别放入3个交配盒,每盒雌雄各3尾,雌鱼和与对照组相比,*P<0.05,**P<0.01.雄鱼分别置于交配盒隔离板两侧。隔离过夜后,给予图1雾霾细颗粒物对斑马鱼胚胎发育的影响光照刺激产卵,同时撤去隔离板,10~30 min后,将成2.2雾霾细颗粒物对斑马鱼胚胎孵化率的影响鱼转移回饲养系统,收集交配盒底部胚胎,于培养箱如图2所示,与对照组相比,斑马鱼胚胎在雾霾中备用。细颗粒物暴露48 h后,随着剂量的升高,胚胎孵化率1.4 PM2.5样品采集逐渐降低。暴露72 h后,只有对照组孵化率达到选择雾霾天气进行采样,采样点位于深圳市某小100%,而800μg/m L剂量组无一粒胚胎孵化。学楼顶无遮挡区域,用细颗粒物采样器采集大气细颗粒物。采样时间为24 h,连续7 d,采样体积为1.3 m 3/min。120****1.5 PM2.5样品前处理100)将载有颗粒物的滤膜剪裁成2 cm×2 cm,浸入去(%80**对照组率离子蒸馏水中,超声振荡3次,每次20 min,洗脱颗粒化60******5μg/m L物。振荡液经6层纱布过滤,滤液于4℃、14 000孵20μg/m L胎r/min离心30 min(半径2.5 cm),收集下层悬液冷冻真胚4080μg/m

参考文献

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