蕙兰杂交种子的无菌萌发和快速繁殖研究

作者:张东旭;李承秀;王长宪;潘银萍;王丰妍;张传芹 刊名:中国农学通报 上传者:王妍

【摘要】实验采用蕙兰传统品种‘崔梅’与普通蕙兰进行杂交,对不同发育阶段的种子进行无菌萌发实验,并作不同培养基的对照。对萌发原球茎的增殖及分化进行研究。探讨不同培养基、6-BA和NAA对根状茎增殖和分化的影响。结果表明:110天的种子接种在KC培养基上萌发效果最佳,蕙兰原球茎增殖的最佳培养基为W+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L,根状茎分化和生根的最佳培养基为MS+NAA1.0mg/L+6-BA0.5mg/L。

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0引言蕙兰(Cymbidiumfaberi),别名中国兰、九华兰、九子兰、夏兰、九节兰、一茎九花,是中国栽培最久和最普及的兰花之一,自古以因其花色雅、花香、叶秀,自古以来,深受人们的喜爱[1],但许多传统名品由于年代久远未能得到很好的保护而失传,造成了不可挽回的损失,因此利用人工杂交的方法,有目的的将传统名品的优良特性遗传给其杂交后代,培育新的蕙兰品种,对于传统品种的保存和野生资源的保护具有十分重要的意义。1材料与方法1.1材料供试验材料为蕙兰传统品种‘崔梅’与普通蕙兰经人工授粉后采收的盆栽蕙兰的蒴果。蕙兰‘崔梅’与普通蕙兰均取自泰安义祥兰园。1.2方法1.2.1人工授粉和蒴果采收于2006年3月19日,选取生长健壮、无病虫害的普通蕙兰植株作为母本。要求苗数在10苗左右,花葶3枚以上。按照程式君[2]的方中国农学通报http://www.casb.org.cn,在母株开花之前事先收集蕙兰‘崔梅’植株的花粉放在滤纸上,卷成筒状,放在小瓶中,塞紧,置于干燥内,放在4冰箱中保存。在母本花葶上每朵小花放的第2天,除去其自身的花粉块,授以预先收集的粉,每一花葶上保留2~3个发育良好的蒴果。将蒴分为五组,分别于授粉后的第50、80、110、140、170采收,供后续试验之需。.2.2种子的无菌播种和原球茎的萌发将采收的未开蒴果置于流水下冲洗干净,在超净工作台上先用0%的酒精浸泡1min,再用升汞溶液浸泡10min,无水冲洗3次。然后将消毒后的蒴果纵切为二,用镊夹取着生于侧膜胎座上的种子,使种子均匀分布在养基上。培养基采用W、KC、MF、B11、Z五种。播后置于培养室中暗培养,培养温度为26,30天后周统计种子萌发情况。.2.3萌发圆球茎的增殖培养以蕙兰种子萌发所得原球茎为外植体,选取大小一致生长旺盛的原球茎,将变褐的部分轻轻刮去,接种于原球茎增殖培养基中。每处理接3瓶,每瓶40个,置于(262),光照14h/天,光强2000lx下培养。1.2.4根状茎的分化和生根诱导以增殖所得根状茎为材料,以MS、W、B5为基本培养基、添加不同浓度6-BA和NAA进行了试验,培养基其它成分同香蕉泥50g/L+糖30g/L+琼脂8g/L,pH5.4~5.6。将增殖所得根状茎单个剖离,轻轻刮净旧培养基,选取大小相同长势一致的根状茎接种,每个处理接4瓶,每瓶接种20个,置于(262),光照14h/天,光强2000lx下培养。2结果与分析2.1果实发育时间与种子萌发的关系分别采收授粉后第50、80、110、140、170天的未开裂蒴果,表面消毒后在无菌条件下取出种子,均匀的播于培养基上。30天后每周统计种子萌发情况,其结果见表1。处理12345发育时间/d5080110140170萌发圆球茎数/个0760937135种子初次萌发时间/d-128977682种子活力持续时间/d-328338143133表1果实发育时间与种子萌发情况统计表图1发育时间与萌发圆球茎数关系图由图1可以看出,种子萌发与否与种子成熟度密相关,授粉50天后的果实种子的胚发育不成熟,种厚,种子量少,含水量高,呈浅绿色透明团状,此时进无菌萌发,未发现有萌发的种子;授粉80天的种子于发育不完全萌发率极低,仅占全部萌发种子的%;发育110天的种子和140天的种子成熟度最佳,呈色粉末状,萌发情况最好,分别占全部萌发种子的6%和60%;因此在此期间采收果实,进行无菌萌发效果最好;授粉170天的果实,种皮变黄,萌发的圆球茎数量较少,这可能与发育过程中积累了萌发抑制物质有关。从种子的萌发速度来看(见图2),在果龄80~140天

参考文献

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