牛病毒性腹泻的诊断与防治

作者:王政; 刊名:畜牧兽医科技信息 上传者:孔德慧

【摘要】本病目前尚无有效治疗,笔者通过加强护理和对症疗法,使病牛增强了机体抵抗力,并逐渐康复。

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近年来,随着畜牧业的转型升级,人们对草食畜的需求越来越大。2018年5月,兴山县一养殖户从外地购进20头母牛。7d后有5头出现不同程度的水样粪便并伴有恶臭、大量粘液和气泡,经现场解剖和实验室诊断,确诊为牛病毒性腹泻,运用利巴韦林、安普霉素等治疗后,控制了发病和死亡,现将该病诊断情况报告如下:1临床症状牛病毒性腹泻为黄病毒科、瘟病毒属的牛病毒性腹泻病毒引起的一种传染病性疾病,这种病也被称为牛黏膜病。1.1急性病畜精神沉郁,厌食,眼鼻有浆液性分泌物,2~3d内鼻镜及口腔黏膜表面糜烂牛突然发病,体温升高至40~42℃,持续3~5d。舌面上皮坏死,流涎增多,呼气恶臭。通常在口内损害之后常发生严重腹泻,开始水泻,以后带有黏液和血。部分病牛有蹄叶炎及趾间皮肤糜烂坏死,从而导致跛行。死于发病后1周。1.2慢性体温高于正常的波动。鼻镜糜烂,病牛消瘦眼有浆液分泌物,门齿齿龈发红。由于蹄叶炎及趾间皮肤糜烂坏死而致的跛行是最明显的症状。2病例剖检尸体消瘦,牛鼻镜、鼻孔有糜烂及溃疡,齿龈、上腭、舌面两侧和颊部黏膜有糜烂,瘤胃黏膜出血,真胃炎性水肿和糜烂。肠壁水肿增厚,肠淋巴结肿大,小肠急性卡他性炎症,空肠、回肠较为严重,盲肠、结肠、直肠有溃疡性以及坏死性炎症。3实验室诊断3.1实验材料3.1.1标准毒株Oregon C24V、标准阳性血清、标准阴性血清均来自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。3.1.2 MDBK细胞、96孔微量板、多道移液器、单道移液器3.1.3培养基(1)稀释液pH7.0~7.2,1mL加100mg链霉素和100IU青霉素。(2)生长液:营养液加10%无BV/BD抗体和污染e152的犊牛血清。(3)维持液:营养液加3%犊牛血清。3.1.4被检血清,56℃灭活30min。3.2实验步骤3.2.1定量测定(1)在96孔微量板中,每孔加入50μL稀释液。(2)用单道移液器吸取50μL灭活的被检血清加于微量板的第一排孔中,每份样品加4个孔。(3)多道移液器调至50μL,从第一孔开始连续做倍比稀释,直至最后一孔,并从最后一孔吸取50μL弃去。(4)用稀释液将标准病毒(Oregon C24V)稀释成含100TCID50/50μL的工作液。(5)从第二孔开始每孔加病毒工作液50μL,第一排孔中加50μL稀释液作为被检血清毒性对照。(6)封板,置于37℃5%CO2培养箱中中和2.5h。(7)每孔加入100μL细胞悬液。(8)封板,置于37℃5%CO2培养箱中培养6d,从第4天开始观察结果,并于第6d作终判。(9)实验对照:(A)阳性血清对照:2倍稀释血清50μL+50μL病毒工作液+100μL细胞悬液。(B)阴性血清对照:2倍稀释血清50μL+50μL病毒工作液+100μL细胞悬液。(C)正常细胞对照:100μL细胞悬液+100μL维持液。(D)病毒用量滴定:将病毒工作液用稀释液作3次10倍递进稀释取:(a)10-1病毒工作液10TCID50/50μL+稀释液50μL+细胞悬液100μL;(b)10-2病毒工作液1TCID50/50μL+稀释液50μL+细胞悬液100μL;(c)10-3病毒工作液0TCID50/50μL+稀释液50μL+细胞悬液100μL;以上各对照均作4孔。3.2.2双份血清测定(1)双份血清取去同一动物,间隔21d。(2)试验方法同3.3结果判定每份血清同一稀释度的4个孔中有两个孔完全被保护,不出现细胞病变(CPE)时,该稀释度倒数即为该血清的抗体滴度。双份血清测定:当间隔21d的第二份血清的滴度高于第一份血清两个或两个以上滴度,则表示该牛正在发病

参考文献

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