食品中10种色素的高效液相色谱同时检测方法

作者:李小云;赵喜玲;李琪;宋丹萍;曾慧;张宏; 刊名:四川师范大学学报(自然科学版) 上传者:蒋才华

【摘要】采用高效液相色谱法建立食品中10种黄色色素的检测方法.甲醇作为溶剂对饮料、糖果、糕点3类样品进行提取,甲醇(A)-0.02 mol/L乙酸铵溶液(B)-乙腈(C)为流动相,Macherey-Nagel C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)为固定相,柱温25 ℃,流速1.0 mL/min,波长435 nm,进样量20 μL.结果显示,10种色素的线性范围为0.25~160.0 μg/mL,饮料、糖果、糕点样品中各色素的加标回收率分别在88.0%~103.6%、88.0%~98.3%、81.4%~106.7%之间.该方法重现性好,灵敏度和准确度高,适用于食品中该10种黄色色素的分析.

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在食品加工业中通常加入各种色素以提高食品的色泽,增加食欲.色素按其用途可分为食用色素和非食用色素.大部分食品中使用较多的是黄色色素.色素使用过程中添加过量、违规添加等现象时有发生,某些色素过量摄入会危害健康[1].因此,食品中色素的分析测定显得尤为重要.色素的检测方法主要是液相色谱法[2-4]以及液相色谱-质谱联用(LC-MS)[5-6].N.Yoshioka等[7]报道了食品中合成色素的检测方法,其中大部分为非食用色素.目前检测食品中合成色素的国家标准,基本以聚酰胺吸附法为样品前处理方法[8-9],而非食用色素的检测尚未有较为全面的国家标准.由于国家标准方法《食品中禁用物质的检测碱性橙染料》[10]仅规定了碱性橙、碱性橙21、碱性橙22的分析测定;因此,针对非食用色素的分析检测还不完善.文献报道的色素处理方法较为繁杂,而能将样品前处理简单化,并且能同时检测含有天然色素、合成色素和非食用黄色色素的液相色谱方法研究较少.本文将允许添加的合成黄色色素柠檬黄、日落黄以及喹啉黄、天然色素姜黄素和非食用色素酸性间胺黄、碱性嫩黄O、碱性橙2、碱性橙21、碱性橙22、酸性橙等10种黄色色素作为研究对象,建立一种能同时检测多种色素的高效液相色谱法.1实验部分1.1试剂与仪器柠檬黄(CAS:1934-21-0)、日落黄(CAS:2783-94-0)、酸性间胺黄(CAS:587-98-4)均购于AccuStandard公司,喹啉黄(CAS:8004-92-0)、姜黄素(CAS:458-37-7)、酸性橙(CAS:633-96-5)、碱性嫩黄O(CAS:2465-27-2)均购于Dr.EhrenstorferGmbH公司,碱性橙2(CAS:532-82-1)、碱性橙21(CAS:3056-93-7)、碱性橙22(CAS:4657-00-5)购于北京振翔工贸有限公司,甲醇、乙腈(均为色谱纯)购于美国BRC公司,其余试剂(分析纯)购于科密欧试剂有限公司.PDA-100液相色谱仪(美国戴安公司),Direct-Q5型超纯水仪(美国Millipore公司),BuchiR-3型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂),BP211D型十万分之一电子天平(德国赛多利斯公司).1.2色谱条件色谱柱:Macherey-NagelC18柱(4.6mm250mm,5m);进样量:20L;柱温:25;流速:1.0mL/min;检测波长:435nm;流动相:甲醇(A)、0.02mol/L乙酸铵溶液(B)、乙腈(C);各流动相梯度洗脱的体积分数见表1.1.3实验方法1.3.1标准品溶液制备准确称取各色素标准品表1各流动相梯度洗脱的体积分数Table1Thegradientelutionvolumefractionofmobilephase时间/min流动相A/%流动相B/%流动相C/%01090042470611257051357430356037338801824280182501090050.0mg于25mL容量瓶中,甲醇溶解并定容,作为质量浓度为2.0mg/mL的各单色素标准储备液,待用.取各单标色素的标准储备液4mL至50mL容量瓶,甲醇定容,得到质量浓度160g/mL混合储备液,待用.1.3.2样品溶液制备称取饮料样品20.0g,旋至近干,加入20mL甲醇,超声20min,离心15min,取上层清液旋蒸至近干,甲醇定容至10mL,溶液过0.45m滤膜,待测.糖果样品称取2.5g,超纯水加热溶解后,加入10mL甲醇,超声30min,离心15min,取上层清液,剩余残渣重复上述操作1次,合并2次提

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