人参皂苷Re促进胰高血糖素样肽-1分泌的研究

作者:高钧;卢守四;张蕾;周宁 刊名:中国药物与临床 上传者:唐兴旺

【摘要】目的探讨人参皂苷Re是否通过促进肠道中胰高血糖素样肽-1的分泌来发挥抗糖尿病的药理机制。方法雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素,结合高糖、高脂饮食4周后,测定空腹血糖。将造模成功的动物随机分成4组,即模型对照组,人参皂苷Re50,100mg/kg治疗组和正常对照组。连续灌胃治疗4周,在治疗期间每周测1次血糖并监测摄食量。治疗4周后,各组大鼠禁食8h,治疗组给药30min后给予葡萄糖溶液3g/kg,腹腔注射戊巴比妥钠麻醉。糖负荷后15min,取大鼠的肝门静脉血、回肠和结肠组织,分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆中的胰岛素含量及血浆、回肠、结肠组织中的胰高血糖素样肽-1的含量。另取一部分回肠组织用ELISA测定胰高血糖素原分泌水平。结果相对于糖尿病模型组,无论是血浆或肠道组织,人参皂苷Re治疗组显著增加了胰高血糖素样肽-1的分泌,实验还显示治疗组显著增加了血浆中胰岛素的含量、降低了血糖和摄食量,改善了糖尿病症状。结论人参皂苷Re可能通过促进肠道组织中胰高血糖素样肽-1的分泌来发挥降血糖、治疗糖尿病的作用。

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人参是治疗糖尿病的常用药物,随着对人参的深入研究,人参的有效成分人参皂苷Re对糖尿病治疗显示很好的药理作用,其主要机制有:抑制肠道对葡萄糖与脂肪的吸收;影响糖脂代谢通路,增加能量消耗;改善胰岛素抵抗;促进胰岛素分泌和减少摄食量等[1,2]。尽管这些药理机制从不同的方面解释了人参皂苷对糖尿病的治疗作用,但相关研究[3]显示:给予人口服和大鼠灌胃人参皂苷100mg/kg,血浆中检测到原形药物仅58g,因其相对分子质量较大,口服吸收量小,生物利用度极低,无法用传统的药物代谢动力学理论解释其抗糖尿病的药理作用。那么人参皂苷Re口服后,富集在肠道的高浓度药物是否直接促进了肠黏膜上L细胞分泌胰高血糖素样肽-1(GLP-1),并通过该途径来发挥降血糖作用,我们对此进行了研究,报告如下。1材料与方法1.1材料:95%人参皂苷Re(购自大连医药生物科技公司);雄性SD大鼠(体质量170~190g)由中科院动物资源中心提供;链脲佐菌素(STZ,Sigma公司,美国),GLP-1酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒和二肽基肽酶(DPP)抑制剂(购自MilliporeResearchCo,美国);胰岛素ELISA试剂盒(北京伊普瑞斯公司);胰高血糖素原ELISA试剂盒(GBD,美中国药物与临床2011年12月第11卷第12期ChineseRemedies&Clinics,December2011,Vol.11,No.12国);葡萄糖粉(北京燕京药业有限公司生产)。1.2方法:STZ诱导大鼠糖尿病动物模型:SD大鼠腹腔注射STZ(35mg/kg),结合高糖、高脂饮食4周后,测定空腹血糖,将造模成功的动物随机分成4组,即模型对照组,人参皂苷Re50,100mg/kg治疗组和正常对照组。模型对照组和正常对照组分别给予0.25%羧甲基纤维素钠(CMC-Na),治疗组给予0.25%CMC-Na溶解的人参皂苷混悬液。连续灌胃治疗4周,在治疗期间每周测1次血糖并监测每周平均摄食量。治疗4周后,各组大鼠禁食8h,治疗组给药30min后给予葡萄糖溶液3g/kg,腹腔注射1%戊巴比妥钠麻醉(0.6ml/100g)。糖负荷后15min开展以下实验操作。1.3测定人参皂苷Re对血浆胰岛素分泌调节实验:收集糖负荷后15min的门静脉血放入含有10l乙二胺四乙酸(EDTA)的试管中,离心、分离血浆,用ELISA试剂盒测定血浆中的胰岛素水平。1.4测定人参皂苷Re对GLP-1分泌调节作用实验:收集糖负荷后15min的门静脉血放入含有10lDPP抑制剂和EDTA的试管中,离心、分离血浆,-80冰箱保存至分析。处死动物,分取回肠(近盲肠段)和结肠(近盲肠段)等肠段,立即用0生理盐水清洗,放入液氮中保存至分析。回、结肠组织按5ml/g组织酸性乙醇提取、匀浆,4保存24h后,2000g离心(离心半径10cm),取上清液,用ELISA方法测定血浆、组织中GLP-1浓度,其中回肠、结肠组织所测得数值与组织的重量相比较即为回肠、结肠中GLP-1的含量。1.5测定胰高血糖素原在结肠组织中分泌水平:取各组大鼠的近端结肠2cm,立即用0生理盐水清洗,放入已标记的封口袋中,并迅速放入液氮中保存至分析。取称重后结肠组织,加入5ml/g组织的酸性乙醇提取液、匀浆,4保存24h后,12000r/min离心,取上清液,用ELISA方法测定结肠组织中胰高血糖素原含量,并用所测得数值与结肠组织的重量相比较即为结肠中胰高血糖素原的含量。1.6统计学分析:用SPSS19.0软件进行数据处理。所有数据以xs表示,采用方差分析。P<0.05

参考文献

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