Burkholderia cepacia XYU-6脂肪酶的克隆及其细胞表面展示

作者:黎小军[1] 林陈水[2] 刊名:江西师范大学学报:自然科学版 上传者:方志

【摘要】通过分析Gen Bank中Burkholderia cepacia脂肪酶的序列,设计简并引物,采用同源克隆的策略,成功地从B.cepacia XYU-6菌株中克隆到脂肪酶基因bcl,其大小为1 095 bp,编码364个氨基酸(Gen Bank登陆号KR233260).将bcl基因与质粒p ET-28b(+)连接并转化大肠杆菌,使脂肪酶BCL的大肠杆菌胞内过表达,其活力是野生菌的12.9倍.通过将bcl基因克隆到细胞表面展示载体p ZXL中,构建脂肪酶BCL的细胞表面展示工程菌,使BCL在Lpp-Omp A引导下定位于大肠杆菌细胞表面,其活力是野生菌的3.9倍.研究结果为脂肪酶BCL后续的分子改造和应用奠定基础.

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